24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1274  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ltakashi

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于扩增未知序列,生物达人请进~ 已有4人参与

本人要扩增一段基因,
在NCBI上找了发现,只有蛋白质序列,
然后,我找了同源序列,进行了比对,
找到了比较保守的区域,
但是,这个保守区域,在我的基因的中间,不是从头开始的,
那么这样的话,我的目的基因就不能扩增全部,
前面至少还有二十来的碱基没有扩增到,
但是我如果用染色体步移TAIL-PCR的话,
发现说明书上说有效的TAII-PCR扩增出的目标片段的大小应该在250bp-2kb,
但是我的未知序列顶多也不超过50bp,
想请问,
我应该怎么扩增得到我要的全序列呢?





或者是我能不能直接把我的蛋白质序列转化成DNA序列,
根据DNA序列设计简并引物来扩增目的基因?

[ Last edited by ltakashi on 2011-2-25 at 16:41 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ltakashi

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by tongxinkxy at 2011-02-25 17:01:25:
不是那个意思
你先把中间的序列得到
然后根据已得的序列,进一步得到两头的序列
我做的时候是用的RACE-PCR做的,
原理都差不多

我还是用步移的方法吗?
8楼2011-02-25 17:02:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

ltakashi

银虫 (小有名气)

在线静等高人出现
2楼2011-02-25 16:39:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongxinkxy

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
未知多少和要测多少没有关系吧
你可以把邻近的序列也当做未知的,测250bp的
3楼2011-02-25 16:49:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
本人认为NCBI上既然有蛋白序列 那应该有核酸序列,到处找找看~你P的是什么基因?
4楼2011-02-25 16:51:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 0703化学 +11 妮妮ninicgb 2026-03-27 11/550 2026-03-29 06:45 by 544594351
[考研] 085600,材料与化工321分求调剂 +9 大馋小子 2026-03-28 9/450 2026-03-28 14:56 by 神马都不懂
[考研] 347求调剂 +3 山顶见α 2026-03-25 3/150 2026-03-28 14:13 by 唐沐儿
[考研] 266分,求材料冶金能源化工等调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-03-27 9/450 2026-03-28 12:22 by zllcz
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 9/450 2026-03-28 09:58 by zhshch
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂,各位老师看看我!!! +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
信息提示
请填处理意见