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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】DNA使用几点疑问！
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shileinjut

至尊木虫 (职业作家)

猪猪家族的猪拽拽

优秀版主

[交流] 【求助/交流】DNA使用几点疑问！ 已有5人参与

DNA长期保存一般置于-20度一下即可，这是常用的策略。要是一连好几天甚至一周都在做检测实验，那如何保存DNA样品呢？请大家不吝赐教！感激之至！
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1楼 2011-02-23 21:10:13
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starseacow

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★
dhd997(金币+1): 量的问题 2011-02-24 09:07:56
分装多管，一次用一管
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2楼2011-02-23 21:15:36
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shileinjut

至尊木虫 (职业作家)

猪猪家族的猪拽拽

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by starseacow at 2011-02-23 21:15:36:
分装多管，一次用一管

是个办法，有没有其他更好的办法呢？
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3楼2011-02-23 21:24:46
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starseacow

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dhd997(金币+1): good 2011-02-24 09:08:08
一周内也可以试试4度保存在TE里，尽量避免反复冻融。
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4楼2011-02-23 21:30:29
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shileinjut

至尊木虫 (职业作家)

猪猪家族的猪拽拽

优秀版主
★
dhd997(金币+1): 一般溶解在TE里面，再看看还有没有其他答案。 2011-02-24 09:08:48
引用回帖:
Originally posted by starseacow at 2011-02-23 21:30:29:
一周内也可以试试4度保存在TE里，尽量避免反复冻融。

谢谢，我们一般不用TE液，直接用无菌水做溶剂，你看合适不？
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5楼2011-02-23 21:31:29
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starseacow

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★
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碱性TE更适合保存酸性DNA，含有的EDTA也可以抑制核酸酶，不影响接下来的实验TE比水要好。不过我还是建议分装。
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6楼2011-02-23 21:34:29
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starseacow

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dhd997(金币+2): good 2011-02-24 09:09:06
如果你担心TE中EDTA影响下游反应，短期用水应该也可以，另外也可以折中一下，用PH 7.5 的Tris-HCl，记得好像在网上看到有人这么做。
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7楼2011-02-23 21:39:49
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shileinjut

至尊木虫 (职业作家)

猪猪家族的猪拽拽

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by starseacow at 2011-02-23 21:39:49:
如果你担心TE中EDTA影响下游反应，短期用水应该也可以，另外也可以折中一下，用PH 7.5 的Tris-HCl，记得好像在网上看到有人这么做。

十分感谢你的建议！我们之前直接买tris-hcl回来配溶液，结果酸性偏低，用KOH调节回来的。但是KOH影响离子强度，现在买了tris-base，想用tris-base来调节tris-hcl的PH，不知道有没有现成的配方？
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8楼2011-02-23 21:53:43
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★
dhd997(金币+1): good 2011-02-24 09:09:38
DNA很稳定，至少在4°的fridge一个月没问题，如果希望时间更长用TEbuffer 溶解
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会当凌绝顶，一览众山小
9楼2011-02-23 23:58:08
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starseacow

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rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-02-24 15:30:38
12.1g tris 溶于80ml水，用4N Hcl调至7.5，定容100ml，配置为0.1 M 的Tris-HCl
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10楼2011-02-24 08:14:37
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