| 查看: 2639 | 回复: 12 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
未知树木虫 (著名写手)
|
[交流]
【求助/交流】如何降低，多克隆抗体非特异性？ 已有7人参与
|
||
|
制备了一种多抗，但是，在进行细胞内免疫荧光实验时，非特异性非常非常的强，几乎与实验组无法区分。 制备过程： 1，克隆目的基因至表达载体pMal-C4x。 2，表达纯化目的蛋白。X-MBP（带有MBP标签的融合蛋白） 3，纯化融合蛋白X-MBP，很纯！ 4，注射新西兰大白兔。 5，收集血清。 PS： 注射大白兔之前，没有切除标签蛋白MBP（约42KDa）. 在western blot试验中， 该抗体的特异性非常好。 但是， 当用于细胞实验室时， 非特异性出奇的高， 实验组和对照组， 一模一样， 几乎看不出任何区别。 在网上查看看了一些方法， 仍然不是太明白。 如何才能有效地降低特异性。 请各位虫友支招，万分感谢~ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有81人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
rainy-shiyu
金虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1261.1
- 帖子: 134
- 在线: 47.4小时
- 虫号: 874925
- 注册: 2009-10-17
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
13楼2013-02-27 07:29:11
dianaofyezi
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1660.1
- 散金: 26
- 帖子: 721
- 在线: 67.1小时
- 虫号: 371239
- 注册: 2007-05-14
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
2楼2011-02-15 09:03:12
snoopyzxx
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 4
- 应助: 49 (小学生)
- 金币: 3232.6
- 散金: 1266
- 红花: 43
- 帖子: 2256
- 在线: 276.6小时
- 虫号: 548497
- 注册: 2008-04-19
- 性别: MM
- 专业: 全球变化生态学
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+5): good 2011-02-15 14:11:36
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+5): good 2011-02-15 14:11:36
|
1、用你纯化的重组蛋白偶联制作亲和层析介质，然后进行亲和纯化。 2、设计多肽免疫。 3、非融合表达目的蛋白。 但不管怎样免疫，用免疫原偶联进行亲和纯化都是需要的。用抗血清效果肯定要差些。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
hyanzi99203楼2011-02-15 09:30:23
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 905 (博后)
- 金币: 16505.5
- 散金: 1654
- 红花: 120
- 沙发: 40
- 帖子: 14451
- 在线: 2170.6小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
4楼2011-02-15 14:05:21