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【求助】新手做病理切片染色
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kno3
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[交流]
【求助】新手做病理切片染色
我是新手。年后就要做病理切片了。老板要的急,年前就要把所用的物品买好,回来直接做。可是我连最基本的步骤的不清楚。就知道要反复的洗染。
需要准备哪些器材?
染色缸需要用几个?
染色前和染色后的相同试剂可以用一个染色缸吗?比如无水乙醇。
染色架用铜的还是塑料的好啊?染料会不会把塑料染上色啊?
求各位大虾指导。
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2011-01-25 23:59:25
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xiaoliudalu
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kno3(金币
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2011-01-27 12:55:39
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zhousumei
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2011-01-27 14:18:19
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mrzouhao
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):谢谢参与
kno3(金币+2): 2011-01-28 23:16:18
http://baike.baidu.com/view/1610300.htm
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2011-01-28 13:35:07
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kno3
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Originally posted by
mrzouhao
at 2011-01-28 13:35:07:
http://baike.baidu.com/view/1610300.htm
石蜡包埋组织是否可以很厚?
如果我要把整个组织按区域切片怎么切?
灌流时组织缩水变形是什么原因?如何避免?
请详细指教一下吧
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5楼
2011-01-28 23:15:59
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ujsyangyong
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):给个红包,谢谢回帖交流
大概过程是先取材,脱水,浸蜡,包埋,切片,脱蜡,染色,脱水,透明,封片几个过程。取材要根据你的实验目的来决定,脱水浸蜡有专门的仪器,包埋是另外的仪器,然后上切片机切片,如果要按区域切片,建议分成几个蜡块包埋。切片好了要烘片,趁热放进二甲苯、梯度酒精脱蜡直至蒸馏水,然后将脱蜡好了的切片染苏木精,根据苏木精效果,一般染色2-3分钟即可,流水冲洗去除多余苏木精,盐酸酒精酸化15秒,弱碱水蓝化,然后染伊红,再梯度酒精脱水,二甲苯透明,树胶封片。脱蜡和脱水的不能公用,需要染色缸23个左右。
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6楼
2011-02-01 01:16:16
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ujsyangyong
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染色缸用铜制的比较好。“灌流时组织缩水变形”你是指动物心脏灌注吗?那你注意一下灌洗用的PBS的渗透压和PH值对不对。
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7楼
2011-02-01 01:18:06
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kno3
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Originally posted by
ujsyangyong
at 2011-02-01 01:18:06:
染色缸用铜制的比较好。“灌流时组织缩水变形”你是指动物心脏灌注吗?那你注意一下灌洗用的PBS的渗透压和PH值对不对。
心脏灌流后,有时侧脑室都挤到一旁了。但是同一批PBS灌流有的灌得就很好,有的就有问题。这是怎么回事啊?是灌流技术的问题吗?还有心脏灌流怎么确认血是否完全冲干净?同样的生理盐水,相同的用量,有的就灌不干净。
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8楼
2011-02-01 08:46:34
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蜗牛123快跑
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能是你灌流时候灌流针扎的位置不一样的问题,我灌流的时候针孔位置不同,PBS有时候会从嘴里和鼻子出来,如果扎对了,直到灌流完成嘴里和鼻子都不会流出的
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9楼
2015-11-13 15:32:50
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kno3
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9楼
:
Originally posted by
蜗牛123快跑
at 2015-11-13 15:32:50
可能是你灌流时候灌流针扎的位置不一样的问题,我灌流的时候针孔位置不同,PBS有时候会从嘴里和鼻子出来,如果扎对了,直到灌流完成嘴里和鼻子都不会流出的
谢谢您的回复。四年前的帖子了,我自己都不记得当时自己怎么笨。问题已经解决了。现在不但能熟练地做各种染色,还能在新实验室建立染色平台。仍感谢您的关注。谢谢!
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10楼
2015-11-13 16:59:06
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