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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 检验 » 【求助】新手做病理切片染色
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kno3

捐助贵宾 (著名写手)

[交流] 【求助】新手做病理切片染色

我是新手。年后就要做病理切片了。老板要的急，年前就要把所用的物品买好，回来直接做。可是我连最基本的步骤的不清楚。就知道要反复的洗染。

需要准备哪些器材？
染色缸需要用几个？
染色前和染色后的相同试剂可以用一个染色缸吗？比如无水乙醇。
染色架用铜的还是塑料的好啊？染料会不会把塑料染上色啊？

求各位大虾指导。
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1楼2011-01-25 23:59:25
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xiaoliudalu

铜虫 (小有名气)
★
kno3(金币+1):谢谢参与
去相关实验室看看
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2楼2011-01-27 12:55:39
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zhousumei

木虫 (知名作家)
★
kno3(金币+1):谢谢参与
找点资料
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3楼2011-01-27 14:18:19
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mrzouhao

木虫之王 (文坛精英)
★
kno3(金币+1):谢谢参与
kno3(金币+2): 2011-01-28 23:16:18
http://baike.baidu.com/view/1610300.htm
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4楼2011-01-28 13:35:07
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kno3

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by mrzouhao at 2011-01-28 13:35:07:
http://baike.baidu.com/view/1610300.htm

石蜡包埋组织是否可以很厚？
如果我要把整个组织按区域切片怎么切？
灌流时组织缩水变形是什么原因？如何避免？
请详细指教一下吧
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5楼2011-01-28 23:15:59
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ujsyangyong

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
大概过程是先取材，脱水，浸蜡，包埋，切片，脱蜡，染色，脱水，透明，封片几个过程。取材要根据你的实验目的来决定，脱水浸蜡有专门的仪器，包埋是另外的仪器，然后上切片机切片，如果要按区域切片，建议分成几个蜡块包埋。切片好了要烘片，趁热放进二甲苯、梯度酒精脱蜡直至蒸馏水，然后将脱蜡好了的切片染苏木精，根据苏木精效果，一般染色2-3分钟即可，流水冲洗去除多余苏木精，盐酸酒精酸化15秒，弱碱水蓝化，然后染伊红，再梯度酒精脱水，二甲苯透明，树胶封片。脱蜡和脱水的不能公用，需要染色缸23个左右。
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6楼2011-02-01 01:16:16
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ujsyangyong

铁杆木虫 (著名写手)
染色缸用铜制的比较好。“灌流时组织缩水变形”你是指动物心脏灌注吗？那你注意一下灌洗用的PBS的渗透压和PH值对不对。
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7楼2011-02-01 01:18:06
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kno3

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by ujsyangyong at 2011-02-01 01:18:06:
染色缸用铜制的比较好。“灌流时组织缩水变形”你是指动物心脏灌注吗？那你注意一下灌洗用的PBS的渗透压和PH值对不对。

心脏灌流后，有时侧脑室都挤到一旁了。但是同一批PBS灌流有的灌得就很好，有的就有问题。这是怎么回事啊？是灌流技术的问题吗？还有心脏灌流怎么确认血是否完全冲干净？同样的生理盐水，相同的用量，有的就灌不干净。
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8楼2011-02-01 08:46:34
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蜗牛123快跑

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是你灌流时候灌流针扎的位置不一样的问题，我灌流的时候针孔位置不同，PBS有时候会从嘴里和鼻子出来，如果扎对了，直到灌流完成嘴里和鼻子都不会流出的
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9楼2015-11-13 15:32:50
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kno3

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 蜗牛123快跑 at 2015-11-13 15:32:50
可能是你灌流时候灌流针扎的位置不一样的问题，我灌流的时候针孔位置不同，PBS有时候会从嘴里和鼻子出来，如果扎对了，直到灌流完成嘴里和鼻子都不会流出的

谢谢您的回复。四年前的帖子了，我自己都不记得当时自己怎么笨。问题已经解决了。现在不但能熟练地做各种染色，还能在新实验室建立染色平台。仍感谢您的关注。谢谢！

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10楼2015-11-13 16:59:06
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