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niumo

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】20%三氯乙酸沉淀蛋白需要多久? 已有14人参与

师姐告诉我说十几分钟就可以,可是之后离心根本没有沉淀,后来我过夜沉淀的,离心后有沉淀,但是对其上清液中的GABA进行检测,含量很少,我想问一下,20%三氯乙酸沉淀蛋白正常需要多久?
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小损样儿

铁杆木虫 (职业作家)

爱可口不爱百事

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nono2009(金币+2, 食品EPI+1): 鼓励应助 2011-04-17 17:34:29
sweety: 回帖置顶 2011-12-30 10:16:29
引用回帖:
Originally posted by niumo at 2011-01-23 19:56:01:
师姐告诉我说十几分钟就可以,可是之后离心根本没有沉淀,后来我过夜沉淀的,离心后有沉淀,但是对其上清液中的GABA进行检测,含量很少,我想问一下,20%三氯乙酸沉淀蛋白正常需要多久?

正常沉淀蛋白用的是15%三氯乙酸溶液,样品与15%三氯乙酸溶液体积比、沉淀温度、沉淀时间、离心时间都会影响蛋白质含量的测定,最佳的试验参数是样品与15%三氯乙酸溶液的体积比1:3,沉淀温度35℃,沉淀时间10 min,离心时间30 min。具体的你可以参考一下附件我提供给你的参考文献,希望可以帮助你。
5楼2011-04-17 17:14:26
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红景天水

木虫 (正式写手)

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树树8013(金币+2): 谢谢红景天水专家的解答。学习。 2011-01-25 10:08:51
我以前都是半个小时的,当然你加入20%的TCA之后要确保混合均匀,我一般是加入TCA后漩涡混匀1Min,然后静置半小时,然后离心的,离心10min左右。
2楼2011-01-24 10:31:33
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lixiao0717

金虫 (初入文坛)

★ ★
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树树8013(金币+1): 谢谢交流,欢迎常在板块发帖、回帖。 2011-04-15 22:57:05
我以前做正交最高用的15%的,时间60min,温度是70~80℃吧
3楼2011-04-15 14:32:02
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子时

至尊木虫 (著名写手)


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对于乳制品沉淀蛋白时,漩涡振荡30s,超声15
min,混匀,离心。
沙子握得越紧流失的越快,适度的去看待身边的点点滴滴。
4楼2011-04-16 11:23:51
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