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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 【求助】20%三氯乙酸沉淀蛋白需要多久？
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niumo

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】20%三氯乙酸沉淀蛋白需要多久？ 已有14人参与

师姐告诉我说十几分钟就可以，可是之后离心根本没有沉淀，后来我过夜沉淀的，离心后有沉淀，但是对其上清液中的GABA进行检测，含量很少，我想问一下，20%三氯乙酸沉淀蛋白正常需要多久？
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1楼 2011-01-23 19:56:01
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lixiao0717

金虫 (初入文坛)
★ ★
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树树8013(金币+1): 谢谢交流，欢迎常在板块发帖、回帖。 2011-04-15 22:57:05
我以前做正交最高用的15%的，时间60min，温度是70~80℃吧
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3楼2011-04-15 14:32:02
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红景天水

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
树树8013(金币+2): 谢谢红景天水专家的解答。学习。 2011-01-25 10:08:51
我以前都是半个小时的，当然你加入20%的TCA之后要确保混合均匀，我一般是加入TCA后漩涡混匀1Min，然后静置半小时，然后离心的，离心10min左右。
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2楼2011-01-24 10:31:33
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子时

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对于乳制品沉淀蛋白时，漩涡振荡30s，超声15
min,混匀，离心。
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沙子握得越紧流失的越快，适度的去看待身边的点点滴滴。
4楼2011-04-16 11:23:51
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小损样儿

铁杆木虫 (职业作家)

爱可口不爱百事
★ ★ ★
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nono2009(金币+2, 食品EPI+1): 鼓励应助 2011-04-17 17:34:29
sweety: 回帖置顶 2011-12-30 10:16:29
引用回帖:
Originally posted by niumo at 2011-01-23 19:56:01:
师姐告诉我说十几分钟就可以，可是之后离心根本没有沉淀，后来我过夜沉淀的，离心后有沉淀，但是对其上清液中的GABA进行检测，含量很少，我想问一下，20%三氯乙酸沉淀蛋白正常需要多久？

正常沉淀蛋白用的是15％三氯乙酸溶液，样品与15％三氯乙酸溶液体积比、沉淀温度、沉淀时间、离心时间都会影响蛋白质含量的测定，最佳的试验参数是样品与15％三氯乙酸溶液的体积比1：3，沉淀温度35℃，沉淀时间10 min，离心时间30 min。具体的你可以参考一下附件我提供给你的参考文献，希望可以帮助你。
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5楼2011-04-17 17:14:26
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