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licy0609

新虫 (初入文坛)


[交流] 【求助】皂苷的分离

我用ODS柱分离皂苷,此皂苷极易溶于水,上样量100mg,色谱条件:0-30min,甲醇浓度从10%-50%,馏分全部收集了,可是最后点板,没有检测到皂苷呢?求助,是怎么回事?谢谢!
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steveplum

至尊木虫 (知名作家)


之前点板有点吗

有些皂苷点板也是没点的
2楼2011-01-21 11:55:06
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licy0609

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by steveplum at 2011-01-21 11:55:06:
之前点板有点吗

有些皂苷点板也是没点的

点了,蓝紫色的点
谢谢
3楼2011-01-21 11:57:02
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steveplum

至尊木虫 (知名作家)



karl2100(金币+1): 谢谢参与讨论! 2011-01-21 12:38:27
引用回帖:
Originally posted by licy0609 at 2011-01-21 11:57:02:

点了,蓝紫色的点
谢谢

再浓缩浓缩,你这个量可能少

要不就是再拿纯甲醇冲柱

不过应该是出来了
4楼2011-01-21 11:59:11
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steveplum

至尊木虫 (知名作家)


引用回帖:
Originally posted by licy0609 at 2011-01-21 11:57:02:

点了,蓝紫色的点
谢谢

蓝紫色的?
你用得什么显色剂啊
5楼2011-01-21 12:00:13
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chfpl_1

金虫 (著名写手)


你是用制备液相制备的吗?没有检测到皂苷,就说明没有洗脱下来,
6楼2011-01-21 12:01:21
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chfpl_1

金虫 (著名写手)


10%硫酸乙醇液 热风吹干,可以显色,
7楼2011-01-21 12:06:48
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licy0609

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by steveplum at 2011-01-21 12:00:13:



蓝紫色的?
你用得什么显色剂啊

硫酸乙醇
8楼2011-01-21 12:07:36
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licy0609

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by steveplum at 2011-01-21 11:59:11:


再浓缩浓缩,你这个量可能少

要不就是再拿纯甲醇冲柱

不过应该是出来了

我上样量100mg呢,一共接了3个组分,没有一个组分能显色。已经是浓缩点样了,还是没有显色
9楼2011-01-21 12:08:51
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licy0609

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by chfpl_1 at 2011-01-21 12:06:48:
10%硫酸乙醇液 热风吹干,可以显色,

我就是那么做的,steel没有~~
10楼2011-01-21 12:09:18
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licy0609

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by chfpl_1 at 2011-01-21 12:01:21:
你是用制备液相制备的吗?没有检测到皂苷,就说明没有洗脱下来,

是制备液相,为什么没有洗脱下来呢?
11楼2011-01-21 12:09:53
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steveplum

至尊木虫 (知名作家)


引用回帖:
Originally posted by licy0609 at 2011-01-21 12:09:53:

是制备液相,为什么没有洗脱下来呢?

你用什么检测器啊

过液相还要接组分点板啊?

难道没接检测器
12楼2011-01-21 12:42:31
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licy0609

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by steveplum at 2011-01-21 12:42:31:



你用什么检测器啊

过液相还要接组分点板啊?

难道没接检测器

没接检测器,一共走了三十分钟,每十分钟接一个组分,走了两针后合并后点板的
我这个样品是比较纯的,应该是一个或两个东西,所以量应该挺大的
所以我就比较纳闷,东西去哪里了?
谢谢
13楼2011-01-21 12:58:39
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steveplum

至尊木虫 (知名作家)


引用回帖:
Originally posted by licy0609 at 2011-01-21 12:58:39:

没接检测器,一共走了三十分钟,每十分钟接一个组分,走了两针后合并后点板的
我这个样品是比较纯的,应该是一个或两个东西,所以量应该挺大的
所以我就比较纳闷,东西去哪里了?
谢谢

是不显色了吧
东西肯定还在
你把柱子好好再冲冲
进样的时候样品溶的好吗,会不会滤掉了
要不就是天气因素不显色了(我遇到过)
14楼2011-01-21 13:01:56
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licy0609

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by steveplum at 2011-01-21 13:01:56:


是不显色了吧
东西肯定还在
你把柱子好好再冲冲
进样的时候样品溶的好吗,会不会滤掉了
要不就是天气因素不显色了(我遇到过)

进样的时候好溶,极易溶于水的,100mg溶在0.5ml的水里
我这两天都有点板,都没显色,还用磷钼酸试过,也没显色
奇怪呢
用纯甲醇冲柱子一个小时呢,冲的溶剂都倒废液缸了,所以不好办了
15楼2011-01-21 13:24:46
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leonard187

木虫 (著名写手)



karl2100(金币+1): 谢谢参与讨论! 2011-01-22 15:13:35
做液相为什么不接检测器呢?可以紫外210nm。
另外可能是流动相没冲下来,用甲醇冲冲试试。
正常的话皂苷硫酸乙醇会显紫色,当然要加热,也许还要加热很久才显色,用电吹风吹。
另外温度和湿度也会影响显色,我曾经在夏天时跑板儿只有放冰箱里才显色的。
16楼2011-01-21 13:29:21
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steveplum

至尊木虫 (知名作家)


licy0609(金币+1): 2011-01-21 15:48:07
引用回帖:
Originally posted by licy0609 at 2011-01-21 13:24:46:

进样的时候好溶,极易溶于水的,100mg溶在0.5ml的水里
我这两天都有点板,都没显色,还用磷钼酸试过,也没显色
奇怪呢
用纯甲醇冲柱子一个小时呢,冲的溶剂都倒废液缸了,所以不好办了

倒入废液了啊

100mg了还折腾什么啊

折腾没了吧

再浓缩点板看看吧,如果实在没有那就不好办了

再用纯水冲冲柱子吧
17楼2011-01-21 13:37:41
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licy0609

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by leonard187 at 2011-01-21 13:29:21:
做液相为什么不接检测器呢?可以紫外210nm。
另外可能是流动相没冲下来,用甲醇冲冲试试。
正常的话皂苷硫酸乙醇会显紫色,当然要加热,也许还要加热很久才显色,用电吹风吹。
另外温度和湿度也会影响显色,我 ...

因为我们这个皂苷在210好像没有吸收
用纯甲醇冲了,可惜倒废液啦……
18楼2011-01-21 15:49:13
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cddryw

铁虫 (正式写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1): 谢谢参与讨论! 2011-01-22 15:13:57
100mg的皂苷粗提物也该有不下于20mg的纯品。如果是纯化,LZ为何要梯度呢?要是和制备柱型号相同的分析柱结合使用,等度洗脱,可以准确算出在分析柱上出现的每一画分在制备柱上下来的时间。
若是我,实在没办法,就把现在分到的所有组分合并,和当初试管里剩余的样品残留,用分析柱做个分析比对,看有什么异样。我分到的皂苷上液相,通常是过完杂质峰后出现的一个单一峰。

[ Last edited by cddryw on 2011-1-22 at 01:01 ]
19楼2011-01-21 23:29:12
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kaixingui

金虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的皂苷后来洗下来了吗?
20楼2011-02-17 12:50:19
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sz168

禁言 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

21楼2011-11-06 12:28:20
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