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飞奔吧珍宝猪

木虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】抑菌试验

感谢各位的热心帮助，我还是希望能用常量肉汤稀释法，不得已才换其他办法（老板的坚持，其实我也更赞同滤纸片法。但是老板也有他的想法)。希望能有更多的虫友给我提建议，谢谢！

我是药物分析方向的，对这方面不是很熟悉，特此请教O(∩_∩)O
   我们和天然药物方向的一个实验室合作，他们负责用不同的有机溶剂去提取某中药中的有效成分，而我们负责评价其抑菌效果。我们拟用常量营养肉汤稀释法，即在液体培养基中加入不同浓度的提取物溶液，而后加入菌接种液，适宜条件下培养后，测定其QD值，用光密度来表征和计算抑菌率。
   问题就这样产生了，由于是有机溶剂提取的，其水溶性必然很差，要想配制较高浓度的提取物水溶液不可实现（即使已经使用了5%DMSO这样的助溶手段）。因此有两点设想：（1）直接将提取出的中药有效部位不经干燥，直接加入液体培养基中，但是常见有机溶剂如乙醇等，本身就有一定的抑菌效果，故需要做等量的纯溶剂的空白对照，然后扣除有机溶剂产生的那部分抑菌效果，但是两者的抑菌效果具有加和性吗？能这样扣除吗？（2）将提取物干燥，之后用5%DMSO助溶，并且用羟乙基纤维素等分散剂，形成均匀的类混悬体系，但如此操作的话，有效成分得不到很好的溶解，对抑菌效果有影响吗？影响的程度大吗？（细胞及药物试验是经常这样实现的）
   希望有相关知识背景及经验的虫友们能给点建议及指导！不胜感激！

[ Last edited by 飞奔吧珍宝猪 on 2011-1-17 at 20:09 ]

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1楼2011-01-17 16:28:46

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

371147760

木虫 (著名写手)

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常量肉汤稀释法

★ ★
飞奔吧珍宝猪(金币+2): 2011-01-21 10:30:01
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~ 2011-04-04 19:45:32

你提取的中药有效成分的浓度高吗，如果高的话你你直接用肉汤稀释，如果稀释的倍数高了那么溶剂（比如说乙醇）的作用就不用考虑了（因为稀释了很多倍），如果有效成分的浓度低的话，可以做个对照也可以干燥后再稀释。
本身用OD值判定结果很不准确，你用常量稀释法直接用眼观察有没细菌生长就可以判定结果吧，也可以用平板计数法判断前后细菌数目的变化情况