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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教大虾：怎么样非变性地分离细菌外膜蛋白复合物啊？
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八月葡萄

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】请教大虾：怎么样非变性地分离细菌外膜蛋白复合物啊？

如题，要分离细菌膜上的外膜蛋白，及与外膜蛋白结合的蛋白，所以不能是变性方法……这方法有人知道吗？
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1楼 2011-01-13 15:42:13
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
哇塞，这个做的很尖端啊，去垢剂的说。。。。。。破碎细胞，收集debris，去垢剂溶解。
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2楼2011-01-13 15:43:57
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八月葡萄

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 八月葡萄 at 2011-01-13 15:42:13:
如题，要分离细菌膜上的外膜蛋白，及与外膜蛋白结合的蛋白，所以不能是变性方法……这方法有人知道吗？

哇塞 果然高人，请教高人，破碎用什么方法，收集离心的条件，去污剂可选哪种，有参考文献是最好的，再不关键词也行，谢啦！我现在有3金币，再不都给你。
赞一下 回复此楼
3楼2011-01-13 16:36:54
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-13 17:29:57
八月葡萄(金币+1):那也得给，多谢多谢！ 2011-01-13 18:38:44
引用回帖:
Originally posted by 八月葡萄 at 2011-01-13 16:36:54:

哇塞 果然高人，请教高人，破碎用什么方法，收集离心的条件，去污剂可选哪种，有参考文献是最好的，再不关键词也行，谢啦！我现在有3金币，再不都给你。

金币就算了哈，没啥用。 破碎用超声或者高压细胞破碎仪就行了。去垢剂的种类很多，跟你研究的目的蛋白的性质有关。

参考文献就太多太多了，我就不给你列举了。

关键词： membrane protein; detergent
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4楼2011-01-13 16:43:07
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
漏了一点，离心收集的条件也跟你要研究的膜蛋白的种类有关，是I\II\III型的。不过大概能将破碎后的细胞碎片离下来就OK了。
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5楼2011-01-13 16:45:20
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