24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

翱宇

禁虫 (正式写手)

将军

应助: 0 (幼儿园)
贵宾: 0.002
金币: 1380.4
散金: 258
红花: 11
沙发: 1
帖子: 765
在线: 223.5小时
虫号: 246429
注册: 2006-04-30
性别: GG
专业: 植物生理与生化

[交流] 【原创】刚才发现的一个做克隆时涂板的小窍门已有15人参与

各位做生物的都是常做克隆的，克隆中也就是以限制性内切酶和连接酶，切下来又连上去。然后就是转化大肠杆菌涂板。但经常发现菌落长的满板都是，尤其是蓝白斑和电转农杆菌的时候。满板的菌落不好挑取，而且还耽误了时间。

我刚才发现了个窍门，是涂板时，4000rpm离心3分钟完毕后，以移液器将菌体沉淀悬浮，吸取4/5的菌液滴到平板的1/2部分，剩余的1/5加至平板的另外1/2部分。涂板时，先涂菌液少的那1/2，然后再涂菌液多的1/2部分。如此以来，像是一个菌液的浓度梯度，最后在抗生素板上长出来的菌落不管多还是少，都是可以继续下一步实验的。

回复此楼

» 猜你喜欢

写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？已经有3人回复
需要合成515-64-0，50g，能接单的留言已经有3人回复
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章已经有10人回复
中科院杭州医学所招收博士生一名（生物分析化学、药物递送）已经有3人回复
临港实验室与上科大联培博士招生1名已经有8人回复
26申博自荐已经有7人回复
想换工作。大多数高校都是评职称时认可5年内在原单位取得的成果吗？已经有4人回复
带资进组求博导收留已经有9人回复

1楼 2011-01-09 15:24:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

专家经验: +248
BioEPI: 73
应助: 257 (大学生)
贵宾: 0.272
金币: 19289.1
散金: 1704
红花: 121
帖子: 6566
在线: 2766.9小时
虫号: 856414
注册: 2009-09-25
性别: GG
专业: 环境微生物学
管辖: 微生物

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+1):谢谢参与 2011-01-10 12:02:03

引用回帖:

Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-09 21:53:26:
原来那个实验室的时候，老板逼着我们用无菌玻璃珠晃。

现在这个实验室我学到了新招，平板都是放在4度好久的，失水了。根本不用涂布，直接吸取200ul在上面，然后注视着中心的液滴，旋转使其扩大，OK。不到扩大到 ...

平板放在4度确实可以使得水分跑到培养皿的盖子上，使得培养基水分少一些，但是相应的也增加了染菌的危险性。放那么久，不是所有的微生物都不能在4度生长的，有的不休眠，再说4度冰箱也不总是4度，时间太长了就长大了，平板就不能用了，所以此招慎用。