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[交流]
【求助】感受态细胞制备
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大家好！ 我在震荡培养至OD600到0.5，后，分装到4个50ml离心管中，按照步骤要冰上放置10分钟，然后离心收集菌体，但是，由于离心机出了点问题，耽误了四十分钟，就是说在冰上放置了将近一个小时，才离心的，呜哇哇，不知道影响大吗？ [ Last edited by rainwander on 2011-1-6 at 17:40 ] |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-07 10:09:59
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-07 10:09:59
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感受态做完后检验一下转化效率呀，并做一下对照。其实感受态这东西也就是转化效率高低的问题而已，除非有特殊实验如建文库什么的需要较高要求的感受态（达到10次方），平时实验中一些小转化，实验室里随便做一下就足够用了。 做感受态一般用的是这种方法（Hioraki Inoue, Hiroshi Nojima and Hiroto Okayama, Transformation of E. coli with plasmids, Gene V.96 (1990), pp. 23-28.）分子克隆上也有，这些都是比较基础的，你自己看看充下电吧！当然，也有许多实验室有自己优化的制备感受态的方法，但大体都差不多。祝实验顺利！ |
9楼2011-01-06 22:21:57
2楼2011-01-06 16:30:14
3楼2011-01-06 17:25:59
4楼2011-01-06 18:29:57