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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】土壤细菌TD-PCR二聚体如何消除[附图]
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clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉

[交流] 【求助/交流】土壤细菌TD-PCR二聚体如何消除[附图] 已有3人参与

我用TD-PCR扩增土壤细菌，目的片段~210bp。电泳图如图所示，有很明显的二聚体，而且越是目的带弱，二聚体越是明显。引物为338F，518R。338F的Tm值为61.83℃，518R的Tm值为59.42℃。TD-PCR的反应体系、反应程序和电泳图如下所示，请大家帮帮忙！谢谢！

 



 



 
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1楼 2011-01-04 20:24:10
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):good 2011-01-05 09:31:17
TD还行吧，可以适当再升升，高不要紧，反正会down下来，关键是低的不能太低了，我一般最低温度用55℃。
另外，模板不知道你直接用的菌体还是提的基因组，如果是基因组的话，可以将模板稀释下。
赞一下(2人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
3楼2011-01-05 09:09:50
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):升得好高啊 2011-01-04 22:25:15
起始温度63度可以继续往高升5-7度。
赞一下(2人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-01-04 20:32:41
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clearth

木虫之王 (正式写手)

专业智能视频监控、工业视觉
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-01-05 09:09:50:
TD还行吧，可以适当再升升，高不要紧，反正会down下来，关键是低的不能太低了，我一般最低温度用55℃。
另外，模板不知道你直接用的菌体还是提的基因组，如果是基因组的话，可以将模板稀释下。

谢谢，我再尝试一下
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4楼2011-01-06 15:12:46
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