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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】提取质粒
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wangdandelia

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】提取质粒 已有5人参与

大家提质粒后的浓度都是多少呢？
那次看到同学的都好几百ng/uL，而我提的一般都是30-60ng/uL，提过好几种质粒了，都是这样子。。。是我的实验操作有问题呢？还是质粒本来拷贝数就那么低呢？
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1楼 2010-12-27 20:28:51
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wangdandelia

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by sanmaoecho at 2010-12-28 15:32:05:

5ml摇菌过夜，不过我估计我提的比他们低一点也有可能是我加了去蛋白液损失一点，他们一般提TOP10,DHa5就把这一步省了

哦，不去蛋白不太好吧？5mL的菌液能提到40~50ug，真的很多。。
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12楼2010-12-29 09:28:38
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-27 21:53:36
有些质粒就这样子的
我提pcDNA可以超过1ug/ul，但是同样的操作对于psiCHECK-2质粒，顶多就300ng/ul，今天还遇到只有30ng/ul的情况
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2楼2010-12-27 20:45:29
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wangdandelia

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-27 20:45:29:
有些质粒就这样子的
我提pcDNA可以超过1ug/ul，但是同样的操作对于psiCHECK-2质粒，顶多就300ng/ul，今天还遇到只有30ng/ul的情况

哦 我提的都是平均水平30ng/ul,对我后来的酶切都很有影响，量太少了，看来下次需要大提了。。。
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3楼2010-12-27 20:52:39
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-12-27 23:23:13
5ml-10ml菌，250ul,250ul,350ul, 试试。再不行就用氯霉素处理几个小时。
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生命不息，探索不止。
4楼2010-12-27 22:14:06
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