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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】很奇怪的细胞污染
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Deluxe

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】很奇怪的细胞污染

我是做原代细胞的 最近几次取了细胞  前两天长的挺好  第三天就污染  培养液变混浊
同学说新配的没加血清的培养基里面有肉眼可见的丝状物质  可是我用同一瓶培养48孔板里的细胞都五六天了 细胞长的很好啊  
我和师弟做了好几次原代了 都污染了 真的会是培养基污染了吗
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1楼2010-12-26 20:48:36
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
Deluxe(金币+1): 2010-12-26 22:03:09
首先还是需要知道是什么原因引起的污染，也或者说你说的并不是污染。只是有类似的现象产生。
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2楼2010-12-26 21:29:53
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Deluxe

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-12-26 21:29:53:
首先还是需要知道是什么原因引起的污染，也或者说你说的并不是污染。只是有类似的现象产生。

培养基已经完全变浑浊了  应该是污染了吧 也没觉得培养基过滤的时候有问题呀
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3楼2010-12-26 22:04:09
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
Deluxe(金币+1): 2010-12-28 14:41:54
污染不是很正常么。。。有什么奇怪的。  尝试看看操作哪部分有漏洞
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4楼2010-12-27 09:55:18
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可可猫

铜虫 (小有名气)
Deluxe(金币+1): 2010-12-28 14:42:01
培养基中加双抗没有？不加双抗原代是容易污染的
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5楼2010-12-27 10:19:03
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sunjie216216

新虫 (初入文坛)
Deluxe(金币+1): 2010-12-28 14:44:28
肯定是血清有问题，我以前也经常在培养的第3、4出现培养液浑浊，现在我配培养液都是基础培养基+胎牛血清+双抗，混匀后过滤灭菌，这样万无一失！
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6楼2010-12-27 12:27:32
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feng__

金虫 (著名写手)
Deluxe(金币+1): 2010-12-28 14:44:30
唉。我们实验室都不叫双抗的······
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7楼2010-12-27 13:13:15
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Deluxe

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sunjie216216 at 2010-12-27 12:27:32:
肯定是血清有问题，我以前也经常在培养的第3、4出现培养液浑浊，现在我配培养液都是基础培养基+胎牛血清+双抗，混匀后过滤灭菌，这样万无一失！

可是没有加血清的培养基都有问题  加上血清以后再过滤 大分子不都过出去了吗 而且过膜会很困难吧
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8楼2010-12-28 14:43:24
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Deluxe

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by feng__ at 2010-12-27 13:13:15:
唉。我们实验室都不叫双抗的······

那叫什么呀 都是抗生素之类的东西吧
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9楼2010-12-28 14:44:02
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feng__

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by Deluxe at 2010-12-28 14:44:02:

那叫什么呀 都是抗生素之类的东西吧

打错字了  是不加双抗
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10楼2010-12-28 14:50:40
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sanmaoecho

金虫 (小有名气)
Deluxe(金币+1): 2010-12-28 21:30:14
引用回帖:
Originally posted by Deluxe at 2010-12-26 20:48:36:
我是做原代细胞的 最近几次取了细胞  前两天长的挺好  第三天就污染  培养液变混浊
同学说新配的没加血清的培养基里面有肉眼可见的丝状物质  可是我用同一瓶培养48孔板里的细胞都五六天了 细胞长的很好啊  
我 ...

我们一般不加双抗，一般没问题。
‘用同一瓶培养48孔板里的细胞都五六天了 细胞长的很好啊’
那你的原代细胞和48孔板的细胞是不是从一个原代传的？
‘新配的没加血清的培养基里面有肉眼可见的丝状物质。’
这个会不会是霉菌？你的培养基单独培养，先确定是不是培养基的问题。
还有可能是操作的问题，不过除非新手，可能性很小。
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11楼2010-12-28 16:11:30
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sanmaoecho

金虫 (小有名气)
Deluxe(金币+1): 2010-12-28 21:30:18
引用回帖:
Originally posted by Deluxe at 2010-12-28 14:43:24:


可是没有加血清的培养基都有问题  加上血清以后再过滤 大分子不都过出去了吗 而且过膜会很困难吧

培养基有问题就果断的丢弃，化学成分都变了。0.22um的膜，什么大分子直径有这么大啊？滤出去的是细胞，细菌，病毒，支衣原体，不溶物。
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12楼2010-12-28 16:14:57
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zhangyan813

金虫 (正式写手)
Deluxe(金币+1): 2010-12-28 21:30:24
肯定是污染了，找到污染源时关键。我上次解冻细胞的时候也是在第一次换液之后开始污染，一开始怀疑是培养液污染，后来换了很多东东，还是污染，而且每次都是第三天来时污染，到最后才找到污染源，原来是37°水浴锅污染，加了新洁尔灭泡了，重新换水之后就解决了污染。所以，楼主一定好好想想到底是哪个环节污染，把所有可能的东东都考虑上，包括移液器，水浴等都有可能是你的污染源。
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13楼2010-12-28 19:24:43
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nb_cmx

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我养间充质干细胞，之前也出现过培养基浑浊现象，后来加双抗也没什么污染，楼上同志说的好，全部过滤，那样可以减少污染的机会。
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14楼2012-03-22 19:56:32
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