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zqt123_1981

木虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】DNA怎么定量？？已有12人参与

各位在做实验的时候ＤＮＡ是怎么定量的啊。我先用分光光度计测的ＤＮＡ浓度，然后根据这个浓度稀释成不同倍数，电泳用λDNA进行比对，为什么同样的浓度两者的亮度不一样啊（比如λDNA20ng,我根据分光光度计测的DNA浓度稀释到20ng）

各位有什么好方法吗？因为我想做优化体系的实验DNA确定不准，最后谁知道是多少浓度呢。

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1楼 2010-12-26 11:05:11

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langduiyue

银虫 (小有名气)

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★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+2):谢谢参与 2010-12-28 13:55:27

引用回帖:

Originally posted by zqt123_1981 at 2010-12-28 10:09:50:

为啥我用正交设计优化PCR体系，16个组合只有4个组合有条带啊没有条带这怎么优化啊？
我用单因素逐一优化的时候，第一个因素优化好了在优化第二个因素的时候跑出来的条带很模糊，这又是怎么回事？难道这该死的 ...

正交设计咱没用过，也不会。一般就是摸一下退火温度，延伸温度。时间上小调一下。在就是体系，模板没问题的话。其他多加点，像酶，dNTP等。在就是摸一下mg2+梯度应该就差不多了。要是还不行，那就是你引物太差劲，引物要是设计不好，其他都是白搭。 LZ 祝你好运！