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【求助/交流】请教:为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收?
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liutaoliu
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【求助/交流】请教:为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收?
为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收?条件:pH7,PBS;0.02U/uL,请高手指点,谢谢!
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2010-12-23 20:34:27
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Originally posted by
brightfuture01
at 2010-12-24 15:18:50:
你再仔细看看这篇文章的methods部分
由于文章是电化学的,所以光学部分的描述很少,根本没有写方法,只有仪器。我查阅了一下其他文献,觉得应该是这样的:那个410nm左右的峰是TNB的。由于卟啉结构的化合物在410nm处也有吸收峰,与TNB的很接近,所以可能有人就把这个位置的峰称为soret band。作者引的那篇文献上虽有soret band,但那篇文章是有关血红蛋白(含卟啉结构)的,就血红蛋白而言,soret band确实反映了其结构。但将其引来证明乙酰胆碱酯酶结构有些断章取义,也不应用吸收峰的移动来证明,而是应该用峰的强度来证明酶固定前后的活性变化。不知您对我的看法有何意见?
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16楼
2010-12-24 16:50:29
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-24 10:20:56
liutaoliu(金币+3):谢谢 2010-12-31 08:09:25
你不会是没有加底物就去测吸收值吧?蛋白的吸收峰往往在280nm处。
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2010-12-23 20:37:47
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-24 10:20:45
liutaoliu(金币+3):谢谢 2010-12-31 08:09:44
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Originally posted by
liutaoliu
at 2010-12-23 20:34:27:
为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收?条件:pH7,PBS;0.02U/uL,请高手指点,谢谢!
你测的是乙酰胆碱酯酶,还是酶反应的产物啊?
酶的话,蛋白质,吸收峰280nm
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3楼
2010-12-23 20:40:25
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Originally posted by
brightfuture01
at 2010-12-23 20:37:47:
你不会是没有加底物就去测吸收值吧?蛋白的吸收峰往往在280nm处。
谢谢回复,但我看文献上就是测的酶的啊(见下图),一直没搞明白。请问您测过吗?是测的底物氯化乙酰硫代胆碱吗?是的话,它的峰在哪儿?谢谢
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4楼
2010-12-24 09:45:35
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