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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教：为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收？
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liutaoliu

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教：为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收？

为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收？条件：pH7,PBS;0.02U/uL,请高手指点，谢谢！
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1楼 2010-12-23 20:34:27
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liutaoliu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-24 15:18:50:


你再仔细看看这篇文章的methods部分

由于文章是电化学的，所以光学部分的描述很少，根本没有写方法，只有仪器。我查阅了一下其他文献，觉得应该是这样的：那个410nm左右的峰是TNB的。由于卟啉结构的化合物在410nm处也有吸收峰，与TNB的很接近，所以可能有人就把这个位置的峰称为soret band。作者引的那篇文献上虽有soret band,但那篇文章是有关血红蛋白（含卟啉结构）的，就血红蛋白而言，soret band确实反映了其结构。但将其引来证明乙酰胆碱酯酶结构有些断章取义，也不应用吸收峰的移动来证明，而是应该用峰的强度来证明酶固定前后的活性变化。不知您对我的看法有何意见？
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16楼2010-12-24 16:50:29
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-24 10:20:56
liutaoliu(金币+3):谢谢 2010-12-31 08:09:25
你不会是没有加底物就去测吸收值吧？蛋白的吸收峰往往在280nm处。
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2楼2010-12-23 20:37:47
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-24 10:20:45
liutaoliu(金币+3):谢谢 2010-12-31 08:09:44
引用回帖:
Originally posted by liutaoliu at 2010-12-23 20:34:27:
为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收？条件：pH7,PBS;0.02U/uL,请高手指点，谢谢！

你测的是乙酰胆碱酯酶，还是酶反应的产物啊？

酶的话，蛋白质，吸收峰280nm
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3楼2010-12-23 20:40:25
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liutaoliu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-23 20:37:47:
你不会是没有加底物就去测吸收值吧？蛋白的吸收峰往往在280nm处。

谢谢回复，但我看文献上就是测的酶的啊（见下图），一直没搞明白。请问您测过吗？是测的底物氯化乙酰硫代胆碱吗？是的话，它的峰在哪儿？谢谢
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4楼2010-12-24 09:45:35
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