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洞洞

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC-ESI-MS联用分析条件选择时需考虑的主要因素有哪些? 已有3人参与

HPLC-ESI-MS联用分析条件选择时需考虑的主要因素有哪些?
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tingzai0116

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
qinhy(金币+2):多谢指教!欢迎常来药学版! 2010-12-22 19:51:39
流动相的选择:优先使用低水比例的溶液为流动相  水含量高降低离子化效果。
                    提高有机相比例可提高离子化效率。
                    一般正离子方式用甲醇,负离子方式用乙腈
                   非挥发性盐和离子对试剂与LC/MS不匹配(竞争抑制)
                     如磷酸盐、枸橼酸盐、硼酸盐
                  可选用挥发性酸、碱和盐
                      如醋酸铵、甲酸铵、甲酸、乙酸、氨水等。
                  为了离子化效果,以上电解质浓度宜小。
                 定性分析时,有时加入NH4+、Li+,帮助判断母离子。但会使图谱复杂。
pH的选择:
                  C18柱pH适用范围是 2 ~ 8。
                   pH值影响离子状态,影响生成气相离子的效率和检测灵敏度。
                        测碱性物质, pH值在(pKa - 2),正离子检测
                        测酸性物质, pH值在(pKa + 2),负离子检测
                     实际工作中,负离子方式检测酸性物质,往往加少量乙酸
                        (<0.05 %)可使灵敏度提高
流动相的流速和色谱柱内径的选择:

流动相流速受柱子内径和流动相组成影响。
较小的流速可获得较好离子化效率。
尽量选内径小的色谱柱。但是要兼顾分析速度的因素,因此多采用内径2.1mm的色谱柱,0.2~0.4ml/min的流速。
只有粗径柱,只能大流量时,可用三通分流以满足MS的流量要求。
流动注射(FIA)比柱分离响应强,但混有待测组分外的物质。
有些样品很容易吸附在进样阀和管路中,因此实验后要对柱子进行冲洗(纯水—纯甲醇)
更详细的课参见专门的书籍
2楼2010-12-22 13:08:10
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洞洞

铜虫 (小有名气)

3楼2010-12-23 11:07:02
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lxrzjut

银虫 (小有名气)

收下用了
4楼2010-12-27 15:44:39
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