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【求助】HPLC-ESI-MS联用分析条件选择时需考虑的主要因素有哪些？ 已有3人参与
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| HPLC-ESI-MS联用分析条件选择时需考虑的主要因素有哪些？ |
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tingzai0116
木虫 (正式写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
qinhy(金币+2):多谢指教！欢迎常来药学版！ 2010-12-22 19:51:39
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流动相的选择：优先使用低水比例的溶液为流动相 水含量高降低离子化效果。 提高有机相比例可提高离子化效率。 一般正离子方式用甲醇，负离子方式用乙腈 非挥发性盐和离子对试剂与LC/MS不匹配(竞争抑制) 如磷酸盐、枸橼酸盐、硼酸盐 可选用挥发性酸、碱和盐 如醋酸铵、甲酸铵、甲酸、乙酸、氨水等。 为了离子化效果，以上电解质浓度宜小。 定性分析时，有时加入NH4+、Li+，帮助判断母离子。但会使图谱复杂。 pH的选择： C18柱pH适用范围是 2 ~ 8。 pH值影响离子状态，影响生成气相离子的效率和检测灵敏度。 测碱性物质， pH值在（pKa - 2），正离子检测 测酸性物质， pH值在（pKa + 2），负离子检测 实际工作中，负离子方式检测酸性物质，往往加少量乙酸 （＜0.05 %）可使灵敏度提高 流动相的流速和色谱柱内径的选择： 流动相流速受柱子内径和流动相组成影响。 较小的流速可获得较好离子化效率。 尽量选内径小的色谱柱。但是要兼顾分析速度的因素，因此多采用内径2.1mm的色谱柱，0.2~0.4ml/min的流速。 只有粗径柱，只能大流量时，可用三通分流以满足MS的流量要求。 流动注射（FIA）比柱分离响应强，但混有待测组分外的物质。 有些样品很容易吸附在进样阀和管路中，因此实验后要对柱子进行冲洗（纯水—纯甲醇） 更详细的课参见专门的书籍 |
2楼2010-12-22 13:08:10
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