| 查看: 893 | 回复: 2 | |||
[交流]
【求助/交流】从血清和尿液中提取RNA的实验方法
|
| 从血清和尿液中提取RNA的实验方法最常用的是什么方法？是不是trizol法？最好能有详细的步骤，谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有266人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求空白血清和空白尿液的配制方法
已经有4人回复
- 血液领域的人物
已经有10人回复
- 有关提取全血DNA和RNA问题。
已经有4人回复
- 请问血清RNA怎样提取？又怎样验证已提取出血清RNA？
已经有19人回复
- 【求助/交流】提血液RNA浓度很低，怎样使其浓度高从而用于反转录
已经有16人回复
- 谁能告诉我怎样在血液的淋巴细胞中提RNA
已经有8人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
中国科学院过程工程研究所 能源环境课题组 博士后招聘启示
+1/183
-
西安石油大学新能源学院接收材料类、能源动力类、机械类、计算机类等专业专硕调剂生！
+1/94
-
原子层沉积装备18817872921
+1/92
-
欢迎加入赣南师范大学智能制造与未来能源学院
+2/48
-
河南工业大学化学化工学院 2026 年硕士调剂正在进行！
+1/40
-
河南工业大学化学化工学院-调剂
+1/39
-
2026年武汉纺织大学材料学院邓波教授团队接收调剂（硕士生4名）
+1/37
-
招收环境工程/化学工程/材料化工专业的调剂生4-5名。
+1/19
-
天津理工大学功能晶体研究院（晶体材料全国重点实验室）杰青团队招收2026年博士研究生
+1/18
-
香港科技大学 机器人/生物医学
+1/11
-
渤海大学储能材料课题组招收调剂研究生
+1/11
-
福建理工大学招收专业代码08开头学术型硕士研究生
+1/9
-
西南科技大学李老师课题组考核招材料科学与工程专业博士研究生（中物院联合培养）
+1/8
-
[杭州电子科技大学]材料学院电池课题组-2026年硕士研究生调剂信息
+1/8
-
26年申博自荐-计算机视觉
+1/7
-
齐鲁工业大学（山东省科学院） 谷亚威老师课题组拟招2026年调剂研究生
+1/7
-
国家大人才课题组招收化学、材料化工类2026年调剂生
+1/7
-
哈尔滨工业大学航天学院复合材料与结构研究所招硕士生
+1/6
-
中科院东莞材料所二维材料与智能器件方向招聘
+1/5
-
找好工作来我这-广东唯一石化院校——资源与环境专硕招生
+1/2
2楼2010-12-16 14:20:12
★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5):鼓励新虫积极参与~~~ 2010-12-16 18:23:03
xu19850927(金币+2):谢谢 2010-12-17 10:39:37
rainwander(金币+5):鼓励新虫积极参与~~~ 2010-12-16 18:23:03
xu19850927(金币+2):谢谢 2010-12-17 10:39:37
|
病毒RNA提取实验方法1，用异硫氰酸胍提取 2，用TRIzol LS提取 3，Trizol 法提病毒protocol 1，用异硫氰酸胍提取 提病毒的详细步骤，可参考： 1.取 200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管 2.加600ul异硫氰酸胍，然后加入对照和样品，再加200ul氯仿，颠倒混匀 3.13000rpm离心15min 4.在第3步离心快结束时，另取同样多eppendorf管，加入400ul -20度预冷的异丙醇 5.取第3步离心的上清（一定不要吸取到中间白色层，第3步离心结束往外拿的时候，管子尽量不要倾斜）转移到第4步准备的管中，颠倒混匀 6.13000rpm离心15min，轻轻倒去上清；在吸水纸上尽量沾干液体 7.加600ul 75％乙醇，颠倒数次以洗涤残存异丙醇 7.13000rpm离心15min，轻轻倒去上清；在吸水纸上尽量沾干液体 8.4000rpm离心10sec，将管壁残存液体甩到底部，用微量枪头吸干，室温干燥2－3min（不可过分干燥，防止下一步RNA不溶解） 9.加入20ul DEPE水(加入depc的纯水高压后的水即为DEPE水)，轻轻混匀溶解RNA。2000rpm离心5sec，冰上保存备用（最好2小时内使用，以免 RNA降解） 2，用TRIzol LS提取 应用TRIzol LS提取病毒RNA 所提取物为血清、血液、液、鸡胚尿囊液等液体中的病毒。提取时尽量在人少时进行，防止空气中RNA酶的污染。所用一切物品也应是无RNA酶的。 1.1 在1.5ml的eppendorf管中加入病毒原液500ul，再加入TRIzol LS 500ul，充分混匀，室温放置10min。 1.2 加入200ul的氯仿，盖紧离心管盖，用力震荡离心管（溶液充分乳化，成乳白状，无分相现象），室温放置10min （由于氯仿沸点低、易挥发，振荡时离心管可能爆开，小心）。 1.3 离心 4℃、13000r/min、15min，取上层液相移入另一管（切忌吸动白色中间相）。 1.4 加入等体积异丙醇，轻轻颠倒离心管充分混匀液体，室温放置10min。 1.5 离心 4℃、13000r/min、15min，（这时乍一看会发现管子里好像没有东西，再仔细看看，会发现靠近管底的壁上有一星点的白色沉淀物，就是它了）用枪小心吸去所有上清。 1.6 1ml75%乙醇洗一遍，离心 4℃、8000r/min、10min，（这时又会发现管子没东西了，不要担心，有的，但是因为量太少看不见罢了）用枪小心吸去所有上清，在超净台中干燥 5min。 1.7 加入适量DEPC处理水。（如果材料来源丰富的话，加入的水量为下一步RT的total减去其他试剂的量；若要省着点用，则自己看着办了，尽量不要加太多的水）。 1.8 建议立即做RT。若要保存，可在上一步加入乙醇后冻存于－70℃，可保存一年；若加入DEPC水后则只能在－20℃保存1个月左右。 3，Trizol 法提病毒protocol Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌，样品量从几十毫克至几克。 1. 取鸡胚尿囊液，加入5-10倍体积 Trizol液，混匀； 2.室温放置5分钟，然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿，盖紧离心管，用手剧烈摇荡离心管15秒； 3.取上层水相于一新的离心管，按每ml Trizol液加0.5ml异丙醇的比例加入异丙醇，室温放置10分钟，12000g离心10分钟； 4.弃去上清液，按每ml Trizol液加入至少1ml的比例加入75%乙醇，混匀，4℃下7500g离心5分钟； 5.重复第4步； 6.小心弃去上清液，然后室温干燥5-10分钟，注意不要干燥过分，否则会降低RNA的溶解度； 7.然后将RNA溶于水中，放置10分钟。 [注意] 1. 整个操作要带口罩及一次性手套，并尽可能在低温下操作。 2.加氯仿前的匀浆液可在-70℃保存一个月以上，RNA沉淀在70%乙醇中可在4℃保存一周，-20℃保存一年 |
3楼2010-12-16 14:27:26
