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guo_yu_qian

银虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助】求助！！！液相走梯度时，空白跟空针都会有较大杂质峰，可能原因有哪些？已有16人参与

液相走梯度时，215nm处走空白跟空针都会有较大杂质峰，可能原因有哪些？流动相是PH4.0的磷酸二氢钾和纯乙腈，向高人请教。Sample Text

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1楼2010-12-13 14:16:52

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guo_yu_qian

银虫 (初入文坛)

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谢谢大家的帮助！

我已经排除的可能有：
1、流动相配制全部是用新的试剂，不存在被污染的问题；
2、岛津的LC-20A是新来的仪器，管路用各种浓度的乙腈冲洗过，而且做其他实验走梯度没有发生类似问题；
3、实验前排气，清洗针头都做了；
4、我的梯度是：0-40分乙腈从2%-30%，40-70分乙腈从30%-50%，70-80分乙腈维持在%50，80-85分乙腈从50%-2%，乙腈2%维持10分结束。
5、在50分左右有个尖峰，不像是梯度峰，连续进空白，结果基本一致。
6、会是柱子的问题吗？我用的两个不同填料的C18柱。有不同但都有类似情况，感觉方法太敏锐了。