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wpjx

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助】灵异事件

最近试验发生灵异事件!

做的是中药分析,里面还有丹酚酸B成分,以前试验情况都比较好,最近频繁发生灵异事件,本人已经濒临崩溃!
具体情况如下:
       丹酚酸B的含量测定用药典方法(甲醇:乙腈:甲酸:水    30:10:1:59)混合在一起的话,进标准品,没有问题,如果将甲醇单独拿出来另外三只混合在一起分A、B流路进行洗脱,发现永远都不会有丹酚酸B的峰出现,连续跑了50分钟,后再进一针,仍然是没有峰,后无奈,换用全混合的流动相进样,之前进的标准品被一次冲出,由于我的实验样品中包含丹酚酸B,本想梯度洗脱将尽可能多的成分分开,发现丹酚酸B的大峰丢失才用了以上多种办法来找原因,最后得出以上结果,有这方面经验的大虾帮忙解释一下吧,我已经试验了两台液相,两个色谱柱,问题同上,崩溃的边缘················╮(╯▽╰)╭

        上帝快点现身吧
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wpjx

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by drugmen at 2010-12-11 18:14:38:
将流动相A、B通道分开后,再混合还能保证原来方法的流动相比例吗?我想应该是这里出问题了。
其他成分的峰依然能洗脱出来吗?您的梯度方法具体是怎样的?

分开后甲醇通道进30%,乙腈甲酸水通道进70%比例绝对没有问题,但是为什么梯度洗脱就是冲不出来?后来我改用的乙腈:磷酸水,乙腈从10%冲到90%70分钟,最后时刻60多分钟,有一根柱子(试了两根)冲出来了,但是很违反常规,理论上还有以前试验的经验都是30%左右就能出峰了,而且按我设的这个梯度30分钟左右也该出峰了(参考药典)。假单的说就是梯度洗脱就不行!
7楼2010-12-12 09:15:00
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月夜魔瞳

银虫 (小有名气)



wpjx(金币+1): 2010-12-12 09:26:41
dream意(金币+1): 2010-12-12 10:10:21
大峰丢失
这个应该是原来的物质因为降解,基团转移,或者和其他物质反应,成为另一种物质了吧。
但是应该会有残余,不然就是流动相或者分析系统和方法的原因导致测不出该物质。

检查一下你的样品中是否含干扰物质吧。比如检查样品杂质中是否有物质和甲醇:乙腈:甲酸:水反应的。
2楼2010-12-11 16:44:28
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wpjx

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by 月夜魔瞳 at 2010-12-11 16:44:28:
大峰丢失
这个应该是原来的物质因为降解,基团转移,或者和其他物质反应,成为另一种物质了吧。
但是应该会有残余,不然就是流动相或者分析系统和方法的原因导致测不出该物质。

检查一下你的样品中是否含干扰 ...

标准品还真是没有问题哦,也没有降解,发现一走梯度此表品的峰就不见了,跑完后,换回混合的流动相用能将其冲出来,一个大峰,很明显的那种
3楼2010-12-11 16:50:14
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wpjx(金币+1): 2010-12-12 09:26:29
qinhy(金币+1):O(∩_∩)O谢谢 2010-12-13 21:22:33
你把甲醇拿走,乙腈水的比例是多少?
是因为洗脱能力降低,冲不出来吧
梯度洗脱也出不来吗?
4楼2010-12-11 17:23:33
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