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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】分段提取蛋白，是否可行？
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xiaosui

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】分段提取蛋白，是否可行？

请搞蛋白的朋友们帮忙分析一下，
     
       最近想要分析一种动物药材中的蛋白成分，考虑可否采用分段提取的办法，即依次用不同的溶液进行提取，这样是不是可行呢？
    我之前做植物药中有效成分提取，常用这种方法，比如：一份样品，先用极性很小的氯仿提取一遍，过滤收集提取液，之中会有小极性的组分；药渣挥干溶剂后，从极性稍大的乙酸乙酯提取，重复上述操作，得到乙酸乙酯提取液中含有极性稍大的组分；以后可以用丁醇，乙醇再提取，这样可以将成分分段提取出来。
    如果可行的话，都用那些提取溶液，先后顺序如何呢？
    还请高人现身，指点迷津，多谢多谢！

[ Last edited by xiaosui on 2010-12-12 at 10:05 ]
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1楼 2010-12-11 09:57:53
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tianhuijuan

金虫 (小有名气)
xiaosui(金币+1): 2010-12-12 14:35:48
听起来是分离蛋白的好方法，做起来难吧..
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2楼2010-12-12 11:20:39
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xiaosui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by tianhuijuan at 2010-12-12 11:20:39:
听起来是分离蛋白的好方法，做起来难吧..

知不知道论坛里做蛋白方面的牛人啊？有的话，告诉我，我跟他请教一下。
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3楼2010-12-12 14:38:39
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aersileng

银虫 (初入文坛)
★ ★
rainwander(金币+2):鼓励积极参与交流~~~ 2010-12-12 16:29:08
xiaosui(金币+1): 2010-12-13 19:27:28
蛋白质分级分离，比如用硫酸铵分级沉淀。或者你提出全蛋白，然后用液相、超滤等做分离。分离成若干组分，就实现了。如果合适，我们这里就可以做技术开发
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4楼2010-12-12 14:46:14
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飞翔156

铁虫 (正式写手)
xiaosui(金币+1): 2010-12-13 19:27:38
蛋白质遇到有机溶剂会变性，失去活性
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5楼2010-12-12 15:12:11
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xiaosui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by aersileng at 2010-12-12 14:46:14:
蛋白质分级分离，比如用硫酸铵分级沉淀。或者你提出全蛋白，然后用液相、超滤等做分离。分离成若干组分，就实现了。如果合适，我们这里就可以做技术开发

您说硫酸铵分级沉淀，也是先提出总蛋白，再进行操作，分成若干组分的吧？
我是想问问，有没有一系列的提取溶液，在蛋白提取阶段，依次的提取出一部分蛋白，实验分级提取。
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6楼2010-12-13 19:32:58
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aersileng

银虫 (初入文坛)
xiaosui(金币+1): 2010-12-19 10:34:48
硫酸铵盐析是可以分级提取的，只是只能粗略的分级，不同硫酸铵溶解度可分出不同的蛋白。
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7楼2010-12-15 18:37:49
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Adam_Li

铜虫 (初入文坛)
为什么不用HPLC呢？
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8楼2010-12-18 17:23:44
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pisng7299楼
2010-12-18 18:18   回复  
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