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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 【求助】Sevag法
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燕子客_翼

禁虫 (小有名气)
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1楼 2010-12-08 12:06:38
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junwen6516

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主
Sevage 法：利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性的特点，将提取液与 Sevage试剂[氯仿：正丁醇=5：1（V/V）]5：1 混合，振荡，离心，变性后的蛋白质介于提取液与 Sevage 试剂交界处。此法的优点是条件温和，不会引起多糖的变性。
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人生若只如初见
3楼2010-12-08 13:43:05
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junwen6516

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lovibond(金币+2):感谢版主交流 2010-12-08 14:25:40
加入0.2倍多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分离，直至氯仿与水的界面无沉淀为止，且要重复处理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白质。
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人生若只如初见
2楼2010-12-08 13:40:56
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luwenjuanlml

铜虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
树树8013(金币+1):鼓励新虫发帖，欢迎luwenjuanlml在食品板块安家落户~~~ 2010-12-08 22:02:22
常用的去除多糖中蛋白质的方法：Sevage 法，三氟三氯乙烷法，三氯醋酸法。最常用的是Sevage 法。其原理是使多糖不沉淀，而使蛋白质沉淀。
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4楼2010-12-08 21:57:00
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七AND七

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
703445楼: Originally posted by junwen6516 at 2010-12-08 13:43:05:
Sevage 法：利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性的特点，将提取液与 Sevage试剂5：1 混合，振荡，离心，变性后的蛋白质介于提取液与 Sevage 试剂交界处。此法的优点是条件温和，不会引起多糖的变性。

为什么我除蛋白时振摇后溶液全部变成了白色的牛奶状，且高速离心后只能得到两层啊（上层是水层，下层的有几层则全部是白色的并没有中间那层啊，请问那下层白白的就是变性蛋白么？肿么会有那么多啊？还是因为剧烈振摇引起的严重乳化呢？）
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5楼2012-04-03 16:43:28
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