| 查看: 2585 | 回复: 31 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】请教达人：想找出两个细菌中差异表达的基因，有什么成熟且便宜的方法？
|
|||
| 现有两株细菌，暂命名为1和2，其中2对于某种抗逆环境具有更高的抵抗力，现在想找出在这种环境下两个菌株差异表达的基因，不知有什么办法？其中菌1已经完成了基因组测序，菌2未测序，由于经费有限，不太可能采用全基因组芯片方法，请教各位达人，有什么既便宜又比较成熟的方法？不胜感激！ |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有151人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教有机机制达人，一个反应机理~~~~
已经有8人回复
- 金币请教达人一求方差的问题，十分着急，要考试了！
已经有16人回复
- 跪求概率论达人问题有关version的问题！！！
已经有4人回复
- 有关2012csc申请的几个问题，请达人踊跃回答
已经有21人回复
- 请教有经验的有机达人——过柱分离问题
已经有10人回复
- 大清早发个求助帖，求微生物达人从形态上鉴别一下这是什么菌
已经有19人回复
- 请问申请北美留学paper的价值问题，求达人帮忙
已经有7人回复
- 请达人帮忙看一下，编辑如下的拒稿理由能否debate一下
已经有6人回复
- 【讨论】请教达人：混合表面活性剂的浓溶液为什么很容易会结皮？
已经有7人回复
- 【求助】向各位前辈达人请教户口问题
已经有10人回复
- 对于一句话的理解~~达人帮帮忙！！！
已经有3人回复
- 【求助/交流】16s进化树+细菌鉴定 达人 请进~~~
已经有5人回复
- 【求助】请问各位食品达人，水中总大肠菌群如何测定？
已经有8人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
温柔善良，重庆女孩，找男友……好像是乱码，内容在40楼看查看
+2/378
-
中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所博士后招聘
+1/284
-
南宁师范大学贺益苗课题组2026年招收有机化学和材料与化工专业拟招生4-5名硕士研究生
+1/195
-
山东建筑大学 （市政与环境工程学院）硕士研究生招生啦 静电纺丝纤维与盐水分离应用
+1/88
-
南方科技大学王鹏团队诚聘药物化学、化学探针、药物递送博士后
+1/79
-
南方医科大学发育生物学教研室夏来新教授课题组审核制博士/硕博连读招生启事
+2/76
-
2026 年山东建筑大学金属增材制造方向硕士研究生调剂公告
+1/44
-
福建师范大学环境与资源学院环境电化学课题组招收2026硕士（含调剂）
+1/29
-
招收荧光探针/有机合成/生物学 博士后--薪金: 30万-50万
+1/28
-
澳大利亚昆士兰大学化工学院招收全奖博士生2名
+1/26
-
武汉工程大学资源生物技术课题组生物/环境/化工/矿物专业硕士、博士研究生招生及调剂
+1/17
-
浙江大学光电学院极端光学技术与仪器国家重点实验室诚聘极紫外阿秒方向博士后
+1/14
-
2026年中国科学院城市环境所与福建农林大学联合培养硕士研究生项目介绍
+1/6
-
澳门理工大学2026人工智能药物发现博士（奖学金+申请考核）
+1/5
-
0854工学-电子信息考研-302分求调剂，接受跨专业，只求有学上！！！ ! ! ! ！
+1/5
-
天津工业大学双一流高校招博士、硕士、博士后
+1/3
-
085602调剂
+1/3
-
5科大招收材料专业硕士
+1/3
-
各种IgG抗体表达系统
+1/3
-
上海交通大学AIMS-Lab招收AI for Science【智能制造】方向2026级博士生
+1/1
版主基本上是每帖必回（看）的
29楼2010-12-13 10:29:03
3楼2010-12-07 22:33:42
4楼2010-12-07 23:34:29
★ ★ ★
qinjysdu(金币+2):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~ 2010-12-08 08:15:07
qinjysdu(金币+2):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~ 2010-12-08 08:15:07
|
Non-radioactive RNA fingerprint procedure First strand cDNA synthesis was performed with 15 mg of total RNA, 500 pmol oligo(dT)18 and 800U Superscript II reverse transcriptase (Life Technologies) in a volume of 100ml RT buffer, following the manufacturer’s instructions. After heat inactivation of reverse transcriptase and RNase A digestion, reaction products were purified from excess oligonucleotides by using a QIAquick kit (Qiagen). cDNA derived from 75 ng of total RNA was used as template for PCR. Amplification was performed in 20 ml of PCR buffer (10mM Tris-Cl pH 8.3, 50mM KCl, 1.5mM MgCl2) with 125mM dNTPs (Pharmacia) and 1mM each primer. For each reaction, two 18-mer oligonucleotides, of arbitrary sequence and a GC content of 61%, were used. Sequences of all 131 oligonucleotides used in this screen can be obtained upon request. All PCR amplifications were performed on an Omni-Gene thermal cycler (Hybaid). After 2 min of denaturation at 948C, 2 units of Taq DNA polymerase (Roche) were added (manual ‘hot start’). After 1 min at 948C, the profile was started with two, low-stringency cycles (948C for 1.5 min, 508C for 3.5 min and 728C for 3 min) followed by 35–40 high-stringency cycles (948C for 1 min, 658C for 1 min, and 728C for 1 min), and a final 5 min extension at 728C. Reaction products were separated on 2% SeaKem LE agarose gels (FMC) for 3.5 h at 6– 7Vcm21 and 88C. Gel and running buffer was 0.5X TBE (50mM Tris-borate pH 7.9, 1mM Na2-EDTA) containing 5mgml21 ethidium bromide. Bands of interest were excised, DNA was eluted with a Jetsorb kit (Genomed) and the amplicons were cloned directly by using a Topo TA cloning kit (Invitrogen). 这种方法比较的原始，应该比较的便宜 |
5楼2010-12-08 04:32:53
