| 查看: 2608 | 回复: 31 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】请教达人：想找出两个细菌中差异表达的基因，有什么成熟且便宜的方法？
|
|||
| 现有两株细菌，暂命名为1和2，其中2对于某种抗逆环境具有更高的抵抗力，现在想找出在这种环境下两个菌株差异表达的基因，不知有什么办法？其中菌1已经完成了基因组测序，菌2未测序，由于经费有限，不太可能采用全基因组芯片方法，请教各位达人，有什么既便宜又比较成熟的方法？不胜感激！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有90人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教有机机制达人，一个反应机理~~~~
已经有8人回复
- 金币请教达人一求方差的问题，十分着急，要考试了！
已经有16人回复
- 跪求概率论达人问题有关version的问题！！！
已经有4人回复
- 有关2012csc申请的几个问题，请达人踊跃回答
已经有21人回复
- 请教有经验的有机达人——过柱分离问题
已经有10人回复
- 大清早发个求助帖，求微生物达人从形态上鉴别一下这是什么菌
已经有19人回复
- 请问申请北美留学paper的价值问题，求达人帮忙
已经有7人回复
- 请达人帮忙看一下，编辑如下的拒稿理由能否debate一下
已经有6人回复
- 【讨论】请教达人：混合表面活性剂的浓溶液为什么很容易会结皮？
已经有7人回复
- 【求助】向各位前辈达人请教户口问题
已经有10人回复
- 对于一句话的理解~~达人帮帮忙！！！
已经有3人回复
- 【求助/交流】16s进化树+细菌鉴定 达人 请进~~~
已经有5人回复
- 【求助】请问各位食品达人，水中总大肠菌群如何测定？
已经有8人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
汕头大学 海洋科学-生物学-生物医药大量接受调剂
+1/188
-
陕西理工大学资源与环境、材料化工部分调剂名额，理工兼收
+1/186
-
湖北师范大学调剂 化学材料类
+1/78
-
大连工业大学纺织与材料工程学院超临界流体技术课题组 研究生调剂
+2/46
-
武汉工程大学材料学院课题组硕士调剂招生
+1/36
-
浙江省人民医院博士后岗位招聘
+1/31
-
211/双一流石河子大学--电催化，CO2捕集和转化
+1/19
-
武汉纺织大学招收化学化工类和材料类研究生调剂生若干名
+1/17
-
申博的看过来，湖南农大2026年农药学 紧急 补招一名博士研究生，时间紧迫
+1/10
-
西华大学材料学院表面科学与工程技术科研团队2026年招收研究生
+1/9
-
【博士招生】天津理工大学国家杰青王铁课题组招收2026年博士研究生
+1/7
-
中国地震局地质研究所+地球物理专业+接收调剂
+1/7
-
现代材料与先进制造团队研究生招收公告
+1/7
-
广东省五邑大学MOFs催化功能材料课题组招收化学/材料背景调剂生
+1/5
-
重庆医科大学感染病教育部重点实验室唐开福课题组2026年拟招学术型博士研究生一名
+1/4
-
CD40L抗体如何调控免疫应答？
+1/3
-
北京石油化工学院VOCs净化技术课题组 招收2026级硕士调剂
+1/3
-
齐齐哈尔大学李莉课题组诚招2026级考研调剂生（学硕和专硕）
+1/3
-
武汉纺织大学全国重点实验室吕永钢教授课题组招收材料、化学、生物相关专业硕士研究生
+1/1
-
西工大海洋研究院招收26年博士后1名
+1/1
18楼2010-12-09 11:07:23
3楼2010-12-07 22:33:42
4楼2010-12-07 23:34:29
★ ★ ★
qinjysdu(金币+2):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~ 2010-12-08 08:15:07
qinjysdu(金币+2):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~ 2010-12-08 08:15:07
|
Non-radioactive RNA fingerprint procedure First strand cDNA synthesis was performed with 15 mg of total RNA, 500 pmol oligo(dT)18 and 800U Superscript II reverse transcriptase (Life Technologies) in a volume of 100ml RT buffer, following the manufacturer’s instructions. After heat inactivation of reverse transcriptase and RNase A digestion, reaction products were purified from excess oligonucleotides by using a QIAquick kit (Qiagen). cDNA derived from 75 ng of total RNA was used as template for PCR. Amplification was performed in 20 ml of PCR buffer (10mM Tris-Cl pH 8.3, 50mM KCl, 1.5mM MgCl2) with 125mM dNTPs (Pharmacia) and 1mM each primer. For each reaction, two 18-mer oligonucleotides, of arbitrary sequence and a GC content of 61%, were used. Sequences of all 131 oligonucleotides used in this screen can be obtained upon request. All PCR amplifications were performed on an Omni-Gene thermal cycler (Hybaid). After 2 min of denaturation at 948C, 2 units of Taq DNA polymerase (Roche) were added (manual ‘hot start’). After 1 min at 948C, the profile was started with two, low-stringency cycles (948C for 1.5 min, 508C for 3.5 min and 728C for 3 min) followed by 35–40 high-stringency cycles (948C for 1 min, 658C for 1 min, and 728C for 1 min), and a final 5 min extension at 728C. Reaction products were separated on 2% SeaKem LE agarose gels (FMC) for 3.5 h at 6– 7Vcm21 and 88C. Gel and running buffer was 0.5X TBE (50mM Tris-borate pH 7.9, 1mM Na2-EDTA) containing 5mgml21 ethidium bromide. Bands of interest were excised, DNA was eluted with a Jetsorb kit (Genomed) and the amplicons were cloned directly by using a Topo TA cloning kit (Invitrogen). 这种方法比较的原始，应该比较的便宜 |
5楼2010-12-08 04:32:53
