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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】柱子柱效降低、峰形不好，该怎么办？
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jianke1986

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】柱子柱效降低、峰形不好，该怎么办？

各位虫友，我的一根新柱子柱效降低、跑出来的峰拖尾变形,有什么好招能够修复柱子么？
  事情是这样的，前段时间用这根新柱子建立了一个方法，早上准备进行稳定性研究时，发现对照品和样品出来的峰形状变样，且保留时间提前了半分多钟（相比之前），压力也比之前小了6Bar，我采用的是等度洗脱。在其他人提醒下，有可能是前面做液相的同学把整个液相系统污染了，她做生物样品竟然没有进行过滤，我在不知情的情况下把新柱子接上去跑了五六针。
  会不会是她的样品残留物把我的柱子给污染了呢？如果是，我该怎么办呢？
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1楼 2010-11-29 20:26:09
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泉泽水

铜虫 (初入文坛)
★
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-12-01 19:29:40
jianke1986(金币+1):谢谢 2010-12-27 22:01:54
最好不要反着冲，你可以用乙腈低流速冲过液，流速设个0.1或0.2都行
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4楼2010-11-30 16:31:23
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无忧子

金虫 (小有名气)
★
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-12-01 19:28:58
jianke1986(金币+1):谢谢啦 2010-12-27 22:01:43
先用纯水把系统流路冲干净，再用大比例的水洗柱子
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3楼2010-11-30 11:09:29
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drugmen

金虫 (正式写手)
★
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-12-01 19:29:09
jianke1986(金币+1):谢谢 2010-12-27 22:02:04
要想让柱子适当的恢复，先弄清楚原先柱子用来做过什么实验。
生物样品，是什么类型的，蛋白？氨基酸？
对了，柱子的类型，什么柱？C18？氨基柱？氰基柱？
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5楼2010-11-30 16:35:51
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feiyanjian

木虫 (著名写手)
★
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-12-01 19:29:20
jianke1986(金币+1):谢谢 2010-12-27 22:02:34
个人觉得你的出峰时间提前半分钟完全不是问题，因为你的流动相比例可能有小小的变化，就会影响到出峰时间。压力减小6Bar可能是受温度影响，你的柱温是多少有控制吗？如果没有控制可能环境温度影响就会是压力变化，我今天早上的柱压就比下午的大了5Bar。峰型出现拖尾可能是柱效降低了，也可能是污染了，建议先用水冲洗，再用乙腈冲洗，接着用异丙醇。异丙醇冲洗完了再用乙腈，再用水。你的样品需要过滤的吗？需要的话在过滤一遍看看有没有改变。
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7楼2010-11-30 17:32:46
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