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jianke1986

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助】柱子柱效降低、峰形不好,该怎么办?

各位虫友,我的一根新柱子柱效降低、跑出来的峰拖尾变形,有什么好招能够修复柱子么?
  事情是这样的,前段时间用这根新柱子建立了一个方法,早上准备进行稳定性研究时,发现对照品和样品出来的峰形状变样,且保留时间提前了半分多钟(相比之前),压力也比之前小了6Bar,我采用的是等度洗脱。在其他人提醒下,有可能是前面做液相的同学把整个液相系统污染了,她做生物样品竟然没有进行过滤,我在不知情的情况下把新柱子接上去跑了五六针。
  会不会是她的样品残留物把我的柱子给污染了呢?如果是,我该怎么办呢?
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kkbyb

木虫 (著名写手)


jianke1986(金币+1):谢谢 2010-12-27 22:00:55
小流速反冲吧
2楼2010-11-30 10:37:38
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无忧子

金虫 (小有名气)



qinhy(金币+1):多谢指教,欢迎常来药学版! 2010-12-01 19:28:58
jianke1986(金币+1):谢谢啦 2010-12-27 22:01:43
先用纯水把系统流路冲干净,再用大比例的水洗柱子
3楼2010-11-30 11:09:29
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泉泽水

铜虫 (初入文坛)



qinhy(金币+1):多谢指教,欢迎常来药学版! 2010-12-01 19:29:40
jianke1986(金币+1):谢谢 2010-12-27 22:01:54
最好不要反着冲,你可以用乙腈低流速冲过液,流速设个0.1或0.2都行
4楼2010-11-30 16:31:23
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drugmen

金虫 (正式写手)



qinhy(金币+1):多谢指教,欢迎常来药学版! 2010-12-01 19:29:09
jianke1986(金币+1):谢谢 2010-12-27 22:02:04
要想让柱子适当的恢复,先弄清楚原先柱子用来做过什么实验。
生物样品,是什么类型的,蛋白?氨基酸?
对了,柱子的类型,什么柱?C18?氨基柱?氰基柱?
5楼2010-11-30 16:35:51
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329124040

铁杆木虫 (正式写手)


你重新过一次
6楼2010-11-30 16:46:56
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feiyanjian

木虫 (著名写手)



qinhy(金币+1):多谢指教,欢迎常来药学版! 2010-12-01 19:29:20
jianke1986(金币+1):谢谢 2010-12-27 22:02:34
个人觉得你的出峰时间提前半分钟完全不是问题,因为你的流动相比例可能有小小的变化,就会影响到出峰时间。压力减小6Bar可能是受温度影响,你的柱温是多少有控制吗?如果没有控制可能环境温度影响就会是压力变化,我今天早上的柱压就比下午的大了5Bar。峰型出现拖尾可能是柱效降低了,也可能是污染了,建议先用水冲洗,再用乙腈冲洗,接着用异丙醇。异丙醇冲洗完了再用乙腈,再用水。你的样品需要过滤的吗?需要的话在过滤一遍看看有没有改变。
7楼2010-11-30 17:32:46
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泉泽水

铜虫 (初入文坛)


同意6楼的说法
8楼2010-12-02 13:15:26
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