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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hqc87

铁虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】关于分离启动子序列

小弟科研快要动工了,第一步就是isolating promoter sequences,没啥经验,也没多少科研经历,望各位大虾指点一二,说说方法步骤及原理,推荐几篇合适的文献也行,图文并茂的最好,先谢谢了。
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wxf8470

木虫 (小有名气)


要分离的启动子序列是已知的还是未知的?分离出来后,什么用途?各种分离方法很多,大多利用PCR.
2楼2010-11-24 08:24:18
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hqc87

铁虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by wxf8470 at 2010-11-24 08:24:18:
要分离的启动子序列是已知的还是未知的?分离出来后,什么用途?各种分离方法很多,大多利用PCR.

具体情况已给你发站内信
3楼2010-11-24 21:56:18
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lxjwishes

银虫 (正式写手)


首先要获得目的基因基因组序列才行 ,进行genome walking
4楼2010-11-25 13:47:27
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leo0078968

银虫 (正式写手)


请教启动子分离

引用回帖:
Originally posted by hqc87 at 2010-11-24 01:52:11:
小弟科研快要动工了,第一步就是isolating promoter sequences,没啥经验,也没多少科研经历,望各位大虾指点一二,说说方法步骤及原理,推荐几篇合适的文献也行,图文并茂的最好,先谢谢了。

我的情况和你相类似哈,怎样分离启动子呢?谢谢
5楼2011-01-09 19:23:35
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hqc87

铁虫 (小有名气)



rainwander(金币+1):呵呵,鼓励与大家一起分享经验~~~ 2011-01-09 21:42:26
引用回帖:
Originally posted by leo0078968 at 2011-01-09 19:23:35:

我的情况和你相类似哈,怎样分离启动子呢?谢谢

我查了查目前用TAIL-PCR方法较多,比较简便,结果也好 但我还没动手做,也不知道什么时候导师才让我做,现在是帮师兄打杂,你要是要的话 留邮箱 我可以给你发几篇我收集的文献什么的,你要是先动手做了,我到时候再向你请教经验 呵呵
6楼2011-01-09 20:54:21
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ymzfeng

金虫 (小有名气)



dhd997(金币+1):谢谢交流。可否详细些? 2011-01-10 09:11:07
可以用Tail-PCR或染色体步移法
7楼2011-01-09 20:57:23
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)



rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-12 19:32:50
一直的话还好说,要是未知的就麻烦点
TAil-pcr,  LA-pcr , Gemone Walking 都行 ,个人觉得LA-pcr不错
8楼2011-01-12 19:04:53
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lutu2013

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
分有基因组参考序列和无基因组参考序列
第一种情况就很好克隆了,翻译起始密码子上游2000bp左右
第二情况就只能根据已知序列做5‘端侧翼序列克隆了,至于克隆方法很多很杂
9楼2014-11-30 13:16:18
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