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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于分离启动子序列
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hqc87

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于分离启动子序列

小弟科研快要动工了，第一步就是isolating promoter sequences，没啥经验，也没多少科研经历，望各位大虾指点一二，说说方法步骤及原理，推荐几篇合适的文献也行，图文并茂的最好，先谢谢了。
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1楼 2010-11-24 01:52:11
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wxf8470

木虫 (小有名气)
要分离的启动子序列是已知的还是未知的？分离出来后，什么用途？各种分离方法很多，大多利用PCR.
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2楼2010-11-24 08:24:18
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hqc87

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wxf8470 at 2010-11-24 08:24:18:
要分离的启动子序列是已知的还是未知的？分离出来后，什么用途？各种分离方法很多，大多利用PCR.

具体情况已给你发站内信
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3楼2010-11-24 21:56:18
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lxjwishes

银虫 (正式写手)
首先要获得目的基因基因组序列才行 ，进行genome walking
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4楼2010-11-25 13:47:27
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leo0078968

银虫 (正式写手)

请教启动子分离

引用回帖:
Originally posted by hqc87 at 2010-11-24 01:52:11:
小弟科研快要动工了，第一步就是isolating promoter sequences，没啥经验，也没多少科研经历，望各位大虾指点一二，说说方法步骤及原理，推荐几篇合适的文献也行，图文并茂的最好，先谢谢了。

我的情况和你相类似哈，怎样分离启动子呢？谢谢
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5楼2011-01-09 19:23:35
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hqc87

铁虫 (小有名气)
★
rainwander(金币+1):呵呵，鼓励与大家一起分享经验~~~ 2011-01-09 21:42:26
引用回帖:
Originally posted by leo0078968 at 2011-01-09 19:23:35:

我的情况和你相类似哈，怎样分离启动子呢？谢谢

我查了查目前用TAIL-PCR方法较多，比较简便，结果也好 但我还没动手做，也不知道什么时候导师才让我做，现在是帮师兄打杂，你要是要的话 留邮箱 我可以给你发几篇我收集的文献什么的，你要是先动手做了，我到时候再向你请教经验 呵呵
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6楼2011-01-09 20:54:21
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ymzfeng

金虫 (小有名气)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流。可否详细些？ 2011-01-10 09:11:07
可以用Tail-PCR或染色体步移法
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7楼2011-01-09 20:57:23
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-12 19:32:50
一直的话还好说，要是未知的就麻烦点
TAil-pcr，  LA-pcr ， Gemone Walking 都行 ，个人觉得LA-pcr不错
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8楼2011-01-12 19:04:53
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lutu2013

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
分有基因组参考序列和无基因组参考序列
第一种情况就很好克隆了，翻译起始密码子上游2000bp左右
第二情况就只能根据已知序列做5‘端侧翼序列克隆了，至于克隆方法很多很杂
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9楼2014-11-30 13:16:18
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