| 查看: 5159 | 回复: 6 | |||
[交流]
【求助】酶标仪测的吸光度如何反应存活细胞数目 已有6人参与
|
|
体外药物对细胞毒性试验中，看文献中经常会用到MTT法，并用酶标仪来测吸光度，吸光值可以间接反应活细胞数目，请问大家： 首先，为什么要用酶标仪而不用紫外分光光度计？ 其次，用酶标仪测出的吸光值如何反应活细胞数目呢？ 在线等答案，谢谢各位了 |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
小霜霜呀» 猜你喜欢
生物学调剂
已经有10人回复
-
求调剂
已经有3人回复
-
320求调剂
已经有5人回复
-
接受任何调剂
已经有7人回复
-
化学070300 求调剂
已经有29人回复
-
297，工科调剂?
已经有5人回复
-
22408 312求调剂
已经有26人回复
-
收到复试调剂但是去不了
已经有8人回复
-
260求调剂
已经有5人回复
-
急需调剂
已经有10人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- MTT测的OD值很小怎么回事。
已经有7人回复
- 使用紫外分光光度计，怎样测量液体的吸光度，能否给出大致的操作步骤
已经有4人回复
- 多功能酶标仪能代替分光光度计吗
已经有6人回复
- 现在细胞存活率测试用什么是主流？
已经有9人回复
- 紫外分光光度计 光密度值
已经有4人回复
- 酶标仪测定OD值多少范围比较准确？
已经有8人回复
- 悬浮细胞的CCK-8测细胞存活率，加下去的药物有吸收怎么办？
已经有4人回复
- 96孔板，用酶标仪测细菌生长曲线
已经有18人回复
- 酶标仪的使用，，求助！
已经有9人回复
- ELISPOT酶联免疫斑点法介绍
已经有9人回复
- 酶标仪测吸光度
已经有3人回复
- 有测过成骨细胞碱性磷酸酶的大师么？
已经有7人回复
- 【求助】细胞毒性实验数据的取舍
已经有12人回复
- 【求助】求MK3酶标仪的配套中文软件
已经有8人回复
- 【求助/交流】关于MTT法吸光度值偏小
已经有21人回复
- 什么是 MTT assay
已经有7人回复
2楼2010-11-21 16:06:25
randomqd
木虫 (小有名气)
樱花骑士
- BioEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2092.6
- 红花: 2
- 帖子: 246
- 在线: 34小时
- 虫号: 350527
- 注册: 2007-04-21
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2010-11-22 10:58:39
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
4楼2010-11-22 11:18:17
chenyanzhen
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1225.6
- 散金: 111
- 帖子: 143
- 在线: 40.1小时
- 虫号: 2066815
- 注册: 2012-10-17
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
5楼2013-06-02 16:57:47
yyy0305
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 114 (高中生)
- 金币: 9555.5
- 散金: 50
- 红花: 30
- 帖子: 1482
- 在线: 383小时
- 虫号: 1571969
- 注册: 2012-01-10
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
先介绍两个概念 1.MTT测细胞活力的原理。MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT，同时在细胞色素C的作用下，生成蓝色（或蓝紫色）不溶于水的甲臜（Formazan），甲臜的多少可以用酶标仪在570nm 处进行测定。在通常情况下，甲臜生成量与活细胞数成正比，因此可根据光密度OD值推测出活细胞的数目。由于死细胞中不含琥珀酸脱氢酶，因此加入MTT 不会有反应。 2.什么是吸光值？假如仪器给出一个光强为A的特定波长的光，透过检测液体后，侦测到的该特定波长的光的强度为B，吸光值OD=log(A/B),吸光值为0，A=B代表检测液体无吸收；吸光值为1，代表A/B=10,仪器给出的光有90%被检测液吸收。读OD的实验的灵敏度一般都不太好，OD值最大也就3，也就是10的3次方的灵敏度，不如 fluorescence（10七次方）灵敏。 也就是说，活细胞数目越多，MTT的转换产物甲臜生成的越多，仪器发出的570nm的波长光被溶液吸收的越多，即OD=log(A/B),光透过溶液后侦测到光强越小，B值越小，OD值越大。酶标仪检测时好像还需要读490nm的波长以消除背景值OD=OD570-OD490。这个方法的灵敏度不够，只能相对，定性的测细胞的多或者少，无法定量计算细胞个数。 无论是分光光度计还是酶标仪，工作原理都是一样的，都可以进行检测的，但是酶标仪更加方便和快捷，适用于96孔板等微孔板的快速读数 |
6楼2013-06-02 17:55:08
谢谢 解决了我的燃眉之急 哈哈哈 7楼2015-04-17 14:00:34
50