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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】关于荧光定量PCR，做过的朋友请进来
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于荧光定量PCR，做过的朋友请进来 已有7人参与

马上要做荧光定量PCR了，不知道会出多少问题，希望能在这里得到前辈们的提点，我用的系统是ABI 7300。
今天第一个问题是，荧光定量PCR的PCR管必须是八联管吗，有什么要求，光学平盖还是光学圆盖，一般的PCR管不行吗？
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1楼 2010-11-17 19:18:23
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zuodongyun

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不一定要用八连管，如果样品多的话，用伯乐的定量PCR板也可以，直接用膜封住就可以，比八连管方便
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2楼2010-11-17 21:36:26
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ebioer

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-11-17 23:21:12
嗯。 八联管是一种经济的方式，用平盖的。 样品多可以用96孔的定量PCR板。 要注意的东西比较多，譬如你得到的RNA里面是否有DNA。 结果曲线是否平滑。 对照是否有效等等。 同时探针设计也有技巧。
试剂选择方面， 反转录的要用较好的试剂。
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3楼2010-11-17 22:35:48
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)

谢谢

引用回帖:
Originally posted by ebioer at 2010-11-17 22:35:48:
嗯。 八联管是一种经济的方式，用平盖的。 样品多可以用96孔的定量PCR板。 要注意的东西比较多，譬如你得到的RNA里面是否有DNA。 结果曲线是否平滑。 对照是否有效等等。 同时探针设计也有技巧。
试剂选择方面， ...

谢谢 后续有什么问题，请多指教
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4楼2010-11-18 16:08:16
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲
还是多看看方法材料再说吧。
各大公司都有在线的很多关于rtpcr的东西。
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5楼2010-11-18 17:11:58
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lzhwin

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
为什么我们用的是384孔板加专用的封闭膜？
我out了吗？
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6楼2010-11-18 18:19:58
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ebioer

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by dovekaoyan at 2010-11-18 16:08:16:

  谢谢 后续有什么问题，请多指教

没有问题！
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7楼2010-11-18 19:34:58
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)
rainwander:建议还是多看一些这方面的基础资料，就不至于做一步问一步了~~~ 2010-12-12 16:23:01
引用回帖:
Originally posted by ebioer at 2010-11-18 19:34:58:

没有问题！

前期提取RNA时候，要使用RNase Free的试剂、器皿、枪头等，请问您是怎么处理的？我提了两次RNA都降解了
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8楼2010-12-12 14:26:17
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by dovekaoyan at 2010-12-12 14:26:17:



前期提取RNA时候，要使用RNase Free的试剂、器皿、枪头等，请问您是怎么处理的？我提了两次RNA都降解了

您认为谁会不看资料就做实验啊，您是这样的吗
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9楼2010-12-17 18:35:29
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zhfb619ncu

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼上说的有道理，做实验前不需先看资料，多找些相关资料，不可麻木做事
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走自己的路上别人去说吧！
10楼2010-12-22 13:08:09
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