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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】一次性细胞培养瓶最长使用时间
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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apple1057

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】一次性细胞培养瓶最长使用时间 已有9人参与

大家好，我们实验室最近刚复苏了一些细胞，可能是细胞状态不太好，细胞长得很慢。然后我们就一直让细胞长，但过了一段时间发现细胞全部漂浮起来，我们操作没有什么问题，我想问问是不是培养的时间太长，培养瓶内存流了太多刺激产物导致的细胞死亡呢？一开始细胞贴壁了，最后又都漂浮，有高手知道是为什么吗？另外，细胞在培养瓶和96孔板中都是边缘丰度很大，中间很少，这是为什么呢？谢谢
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1楼 2010-11-11 14:28:47
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
边缘多中间少与培养器皿应该没关系吧
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
2楼2010-11-11 15:37:14
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Rubisco580

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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amisking(金币+2): 2010-11-11 21:44:15
复苏的细胞多久第一次换液？我怀疑是楼主一直不换液使得DMSO没有被除掉。
第二个问题，培养瓶边缘细胞丰度大，如果楼主用的是玻璃瓶可能是瓶子内部不平导致的。96孔板里面的细胞就有长在边上的特征，换24孔板就去中间了，我养悬浮细胞的时候这种现象更明显。
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3楼2010-11-11 16:05:11
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熊鹰

铁虫 (初入文坛)
可能是时间太久了吧
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4楼2010-11-11 16:49:48
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zhrei98

禁虫 (初入文坛)
★
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5楼2010-11-11 17:02:12
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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amisking(金币+2):good！ 2010-11-11 21:44:26
细胞状态不好时，生长缓慢时，可以经常换液，保持营养充足和代谢废物的低浓度。

用孔板培养细胞时，加入细胞时不要旋转混匀。将培养板前后左右倾斜混匀（十字交叉）。
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6楼2010-11-11 21:27:39
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leo_stu

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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scelab(金币+5):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-11-11 23:17:06
想过细胞可谓是比吃的饭多。 我来回答下楼主吧。
你的细胞可能在取出来的时候不太好了。 幸好，刚出来还可以贴。 建议24小时后换液。 你最好用6孔板先，让细胞有聚焦效应。 长多了后，才分到96孔做实验
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-------------------------Science，Cell，Nature---------------
7楼2010-11-11 23:04:00
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leo_stu

铁虫 (初入文坛)
★ ★
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lstt09nk(金币+1):感谢交流 2010-11-12 09:17:49
附加，必要的时候换别的培养基试试。 板一定要用好的，如Corning的。 刚接下去的时候，一定要保证有一定的密度，且均匀。
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-------------------------Science，Cell，Nature---------------
8楼2010-11-11 23:06:19
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apple1057

新虫 (初入文坛)
我想请问96孔板如何旋转混匀啊？还有如何将培养板前后左右倾斜混匀，这个方法我以前没听过，我是新手。谢谢
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9楼2010-11-12 10:33:49
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apple1057

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by Rubisco580 at 2010-11-11 16:05:11:
复苏的细胞多久第一次换液？我怀疑是楼主一直不换液使得DMSO没有被除掉。
第二个问题，培养瓶边缘细胞丰度大，如果楼主用的是玻璃瓶可能是瓶子内部不平导致的。96孔板里面的细胞就有长在边上的特征，换24孔板就去 ...

谢谢，不过我们实验室都是用复苏后加培养基离心的方法，不会受到DMSO的影响的。
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10楼2010-11-12 10:43:28
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