24小时热门版块排行榜    

查看: 5883  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

夏菡小屋

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR加各种反应溶液时为什么要在冰浴环境中进行?? 已有11人参与

最近在做实验时,遇到了一些疑问..查了一些资料 说法不一...希望大家给个准确点的答复..嘻嘻
主要原因是因为1.Taq酶以及引物在常温下易变性而导致失活
还是 2.在常温下,引物就会在tap的作用下发生反应,发生错配产生错误的PCR产物
还是3.在冰上做能保持扩增的特异性
感觉都有道理..但是和老师交流了一下,老师只是笑了笑,让我回来查资料..不解啊..
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


amisking(金币+1):good! 2010-11-10 19:00:14
1、酶活性越高,半衰期越短
2、室温下,酶反应会缓慢进行,产生非特异的产物
5楼2010-11-10 16:20:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

hkfgwww

银虫 (正式写手)

PCR哪有这么复杂的,常温下没有问题的,除非高保真酶。
微生物发酵
2楼2010-11-10 14:32:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-11-10 16:11:08
你列举的三点都是有道理的,但实际实验过程中只要在室温下操作就可以了,记得把所有东西加完后最后再把酶拿出来加上。如果你不是在做实验的时候速度奇慢,那上面的三点对实验结果基本没什么影响
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
3楼2010-11-10 14:54:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

langduiyue

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-11-10 23:13:31
我觉的 那是相对于以前非热激活酶而言,pcr时温度能达到90多度,常温降解 有点扯,又不是长时间放在常温下。我们一直是常温做pcr 也没见有啥不妥。    到底是不是低温更好,也请高手指点
角逐自我
4楼2010-11-10 16:11:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 12/600 2026-03-01 22:10 by 海嵙Y
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +5 YXCT 2026-03-01 5/250 2026-03-01 21:54 by 公瑾逍遥
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 0805总分292,求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 0856调剂 +4 刘梦微 2026-02-28 4/200 2026-03-01 15:35 by 吸一口猫气
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见