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caojinxuan银虫 (正式写手)
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【求助/交流】求助分子生物学问题 已有4人参与
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| 我想将2个基因串联，然后进行扩增，扩增产物为2个基因的串联序列，请问该怎么操作？ |
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wxf8470
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2楼2010-11-10 00:53:30
caojinxuan
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dhd997(金币+3):good 2010-11-10 16:10:37
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只通过pcr的方法来解决你的问题：假设你的两条基因分别命名为A,B，且要按顺序串联，最终得到的片段命名为AB。 （1）设立一对引物，其中正向引物的设法是：引物的前半部分为A片段的最后20-25个碱基，引物的后半部分为B片段的最前端的15-20个碱基；设反向引物的原理与此相同，楼主自己想想该怎么设。 （2）扩增片段：用A的首引物和刚才设定的反向引物来扩增A片段，同理，用刚设定的正向引物和B的尾引物来扩增B片段。那么所得到的两个新片段都含有一段相同的overlap （3）以新得到的两个片段为模板，用A的首引物和B得尾引物做PCR，即可得到你想要的序列 |
5楼2010-11-10 15:07:33
wxf8470
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6楼2010-11-11 04:20:11
