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douyaaya

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助】液相色谱拖尾问题

现在遇到个问题,安捷伦1200的液相跑蛋白质时拖尾严重,流动相PH值为2左右,但跑化药的时候就没有拖尾问题,请问各位虫友有没有知道是什么原因的!
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cqyc007

金虫 (小有名气)


你这个问题很简单~
是由于样品造成的。蛋白是大分子,它的保留行为和化药(小分子)完全不同。即便你去查文献,也找不到几篇蛋白分离的。这个课题好好做,发文章应该比较容易哦,不过难度有点大
2楼2010-11-09 22:01:37
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wangxindream

金虫 (正式写手)


蛋白质的含氮有部分碱性,用酸性洗脱或解析就存在问题.

引用回帖:
Originally posted by douyaaya at 2010-11-09 19:34:52:
现在遇到个问题,安捷伦1200的液相跑蛋白质时拖尾严重,流动相PH值为2左右,但跑化药的时候就没有拖尾问题,请问各位虫友有没有知道是什么原因的!

内容如上.
3楼2010-11-09 22:04:23
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ouhua

金虫 (著名写手)


用蛋白柱做分离才行的,一般的柱不行。你用什么柱
4楼2010-11-09 22:14:24
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巧克力冰棍儿

银虫 (小有名气)


douyaaya(金币+1): 2010-11-10 19:21:01
如果蛋白质带正电的话,会与硅醇基有次级作用,拖尾的主要原因就是有次级作用的存在。建议你使用封端的柱子。消除次级作用。
5楼2010-11-10 10:09:10
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douyaaya

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by cqyc007 at 2010-11-09 22:01:37:
你这个问题很简单~
是由于样品造成的。蛋白是大分子,它的保留行为和化药(小分子)完全不同。即便你去查文献,也找不到几篇蛋白分离的。这个课题好好做,发文章应该比较容易哦,不过难度有点大

不好意思,忘了说明是药典的方法,已经很成熟了,是仪器出了问题才这样的
6楼2010-11-10 19:19:17
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