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【求助/交流】SDS-PAGE检测蛋白纯度已有11人参与
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| 大家好，我现在有一些蛋白质的冻干粉，想用SDS-PAGE测一下纯度，应该如何做？胶跑完之后，该如何处理，怎么计算浓度？望不吝赐教，谢谢！ |
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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首先，你需要将你的蛋白溶解！然后加热处理之后电泳，电泳之后染色，通过相关仪器或者直接相机照相，利用bandscan来估计蛋白纯度！ 2. 如果你想利用SDS-PAGE来测定蛋白浓度话，建议你在电泳时，在你蛋白旁边的泳道点一个BSA梯度（BSA浓度是确定的！例如你配一个0.5mg/ml），分别点1ug,2ug,4ug,6ug,8ug,10ug！电泳之后照相，利用PS，根据BSA比对的方法！首先将BSA的标准曲线做出来，然后根据你的protein的累计密度计算出他的质量，进而算出他的浓度！这种做法比一般的BSA比对方法可能更准确点！但是，利用SDS-page来测定蛋白浓度只是定性实验，如果想准确定量测定，建议你还是换bradford法或UV280等方法！ 好吧，就这么多吧，希望对你有用！ |
21楼2013-05-25 08:29:31
lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
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3楼2010-11-03 14:21:56
HarveyWang
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海外行者
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4楼2010-11-03 16:10:59
5楼2010-11-03 17:12:16