| 查看: 3739 | 回复: 15 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
gdongli8325铁杆木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】PCR产物A加尾
|
||
| 我是用Phusion 高保真酶做的PCR，但所用的载体是TA载体，所以需要A加尾。第一次我是这样做的：先用试剂盒将PCR产物纯化，然后加buffer, Taq, dATP，但是没有加上。后来分析可能是保真酶的内切酶活性还存在，于是就用酚、氯仿 将PCR 纯化，然后进行A加尾，但还是失败了。本来以为这是很简单的事情，但折腾了很久了。所以在此请教大家：究竟怎么样才能加上A尾巴？是否有既可以加上A又具有保真性的酶呢？因为要构建超表达载体，所以必须是保真的。 |
回复此楼» 猜你喜欢
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有282人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
本帖内容被屏蔽 |
13楼2012-12-15 22:24:49
anlewo7777
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 1786.8
- 散金: 7
- 红花: 3
- 帖子: 341
- 在线: 108.3小时
- 虫号: 314883
- 注册: 2007-02-25
- 性别: GG
- 专业: 微生物
2楼2010-11-03 07:27:00
zzq770204
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 13599.5
- 散金: 2589
- 红花: 8
- 帖子: 1728
- 在线: 450.6小时
- 虫号: 96206
- 注册: 2005-11-06
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
3楼2010-11-03 07:51:17
lixg
铁杆木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 7627.1
- 散金: 1
- 红花: 7
- 帖子: 591
- 在线: 106.4小时
- 虫号: 859417
- 注册: 2009-09-29
- 专业: 发育生物学
4楼2010-11-03 08:42:35