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toni-2009

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】求教肝细胞原代培养! 已有8人参与

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前一段时间养了一下肝原代细胞(昆明小鼠与金黄地鼠),养得还行,贴壁铺展得都很好,但是最近养却贴壁还行,但是却不铺展开,向高手请教肝细胞原代培养应该注意什么,有何高见!在此谢了
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0640409

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by lamborghini_ at 2013-03-21 21:00:25
你好,我想请教一下你。我在提取细胞时第一步灌流和你所说的方法有所不同,我是把肝脏取出后,再插管,用棉线绑紧管子,肝脏就会膨胀起来,然后依次灌流。其他的步骤大同小异,但是每次提取都不成功,细胞活性不高 ...

原代肝细胞很脆弱的,因为代谢强,取出到插管过程中缺血影响肝细胞活力,一般还是建议在体灌流,我做的感觉就是你剪开血管后到插管灌流的时间,也就是肝脏缺血时间和你细胞活力成反比!
11楼2013-09-22 16:10:02
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toni-2009

金虫 (小有名气)

没人回应呢!

自己顶起来好了
2楼2010-11-03 16:57:00
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rf1055

银虫 (初入文坛)

toni-2009(金币+2):谢谢:) 2010-11-05 15:26:59
培养基有问题没有?营养素够了吗?污染没有?
3楼2010-11-05 14:46:28
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toni-2009

金虫 (小有名气)

培养基和上次的一样

培养基和之前的一样,整个灌流过程也一样就是上次是昆明小鼠,这次换成了C57,还有发现配置的培养基(不完全培养基)放时间长了(10天)颜色变了偏酸性了,应该不是染菌,但是我里面加了VC,是不是和这个有关?
4楼2010-11-05 15:26:35
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