| 查看: 2433 | 回复: 15 | |||
toni-2009金虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助】求教肝细胞原代培养! 已有8人参与
|
||
|
Sample Text 前一段时间养了一下肝原代细胞(昆明小鼠与金黄地鼠),养得还行,贴壁铺展得都很好,但是最近养却贴壁还行,但是却不铺展开,向高手请教肝细胞原代培养应该注意什么,有何高见!在此谢了  |
回复此楼» 猜你喜欢
职称评审没过，求安慰
已经有56人回复
-
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章
已经有5人回复
-
26申博自荐
已经有3人回复
-
A期刊撤稿
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 培养基的配置的求教
已经有12人回复
- 求教：细菌过程中，培养基中剩余氮源的含量如何测定？
已经有22人回复
- 从原代开始培养的骨髓间充质干细胞会不会随着培养时间的延长而开始分化？
已经有14人回复
- 【课件】细胞传代及原代培养，传代培养实验
已经有107人回复
- 原代细胞培养细胞量少
已经有3人回复
- 【交流】原代肝细胞培养
已经有13人回复
- 【求助/交流】细胞传代培养——怎么判段何时应该传代培养？
已经有13人回复
- 原代细胞培养，支原体污染问题
已经有5人回复
- 【推荐】973 三维培养干细胞自我更新与定向分化的调控网络
已经有9人回复
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
你好，我们实验室也在培养大鼠原代肝细胞，也是采用灌流法培养的，长得都很好，现在对肝细胞培养已经很成熟了。这个是我们实验的方法，希望对你有所帮助。 培养基本操作方法 a.将小/大鼠进行麻醉，待其进入深度麻醉状态后迅速将其固定于解剖板上，于超净台中解剖，暴露肝脏； b.沿肝门静脉插管固定，灌流前灌流液T1（37℃下预热），流速5ml/min，待肝脏膨胀后迅速剪断下腔静脉, 灌流15min； c.前灌流液灌流完后，立即灌流后灌流液T2（37℃下预热），流速3ml/min，5-10min； d.取下肝脏，置于平皿中，冰上剪碎肝组织，200目滤网过滤；用基础培养基清洗网上组织； e.收集滤液，600rpm 离心2min；重复一次； f.弃上清，往沉淀中加2ml完全培养基，重悬细胞后，台盼蓝染色计数，将细胞接种至鼠尾胶原包被的25cm2培养瓶中，37℃ 5%CO2培养箱中培养观察。 PS:现实验室要清原代细胞库存，有需要的同行可以与我联系哦，完全是帮大家节省时间哦。0510-86419770或者发邮件：mi.fang@chiscientific.cn |
9楼2012-05-17 14:14:43
lamborghini_
铜虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 472.5
- 散金: 1510
- 红花: 1
- 帖子: 317
- 在线: 180.6小时
- 虫号: 2239546
- 注册: 2013-01-14
- 性别: MM
- 专业: 中药消化与呼吸药理
10楼2013-03-21 21:00:25
toni-2009
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1163.2
- 散金: 920
- 帖子: 242
- 在线: 103.1小时
- 虫号: 929685
- 注册: 2009-12-17
- 专业: 药物学其他科学问题
2楼2010-11-03 16:57:00
3楼2010-11-05 14:46:28
toni-2009
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1163.2
- 散金: 920
- 帖子: 242
- 在线: 103.1小时
- 虫号: 929685
- 注册: 2009-12-17
- 专业: 药物学其他科学问题
4楼2010-11-05 15:26:35
5楼2012-03-03 17:42:59
mc0326
金虫 (小有名气)
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 1104.8
- 红花: 4
- 帖子: 234
- 在线: 38.5小时
- 虫号: 1669370
- 注册: 2012-03-06
- 性别: MM
- 专业: 药物代谢与药物动力学
6楼2012-03-06 15:11:13
7楼2012-05-09 09:27:20
8楼2012-05-09 09:28:39