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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】求教肝细胞原代培养!
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toni-2009

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】求教肝细胞原代培养! 已有8人参与

Sample Text
前一段时间养了一下肝原代细胞(昆明小鼠与金黄地鼠),养得还行,贴壁铺展得都很好,但是最近养却贴壁还行,但是却不铺展开,向高手请教肝细胞原代培养应该注意什么,有何高见!在此谢了
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1楼 2010-11-02 15:35:09
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lamborghini_

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2397885楼: Originally posted by chiscien at 2012-05-17 14:14:43
你好，我们实验室也在培养大鼠原代肝细胞，也是采用灌流法培养的，长得都很好，现在对肝细胞培养已经很成熟了。这个是我们实验的方法，希望对你有所帮助。
培养基本操作方法
a.将小/大鼠进行麻醉，待其进入深度麻 ...

你好，我想请教一下你。我在提取细胞时第一步灌流和你所说的方法有所不同，我是把肝脏取出后，再插管，用棉线绑紧管子，肝脏就会膨胀起来，然后依次灌流。其他的步骤大同小异，但是每次提取都不成功，细胞活性不高，也不知道是什么地方出现问题。我猜也许是第二步灌流时间拿捏不准，请问你在用灌流液2消化时是怎么判断细胞已经消化可以停止灌流了？
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以勤奋为信仰者必成大器
10楼2013-03-21 21:00:25
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toni-2009

金虫 (小有名气)

没人回应呢！

自己顶起来好了
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2楼2010-11-03 16:57:00
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rf1055

银虫 (初入文坛)
toni-2009(金币+2):谢谢:) 2010-11-05 15:26:59
培养基有问题没有？营养素够了吗？污染没有？
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3楼2010-11-05 14:46:28
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toni-2009

金虫 (小有名气)

培养基和上次的一样

培养基和之前的一样,整个灌流过程也一样就是上次是昆明小鼠,这次换成了C57,还有发现配置的培养基(不完全培养基)放时间长了(10天)颜色变了偏酸性了,应该不是染菌,但是我里面加了VC,是不是和这个有关?
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4楼2010-11-05 15:26:35
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