应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求教分子高手
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/2返回列表12下一页
查看: 998  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hflf

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求教分子高手 已有10人参与

改造一个载体，利用BamHⅠ和 XohⅠ切除中间片段，可是一直切不动，而单独用这两个酶能切动，有人说是因为这两个位点之间的距离太短（约30bp）导致双酶切难以作用。
不知道什么原因，高手解释一下，希望能给个好的建议，实验卡在这里，真是郁闷！应该不难的却搞了好长时间没进展！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
行到水穷处，坐看云起时！
1楼 2010-11-01 11:51:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hflf

金虫 (小有名气)
不好意思，是XhoⅠ，写错了，多谢提醒
赞一下 回复此楼
行到水穷处，坐看云起时！
2楼2010-11-01 12:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
那就单切呗……双酶切不动可能是buffer没配套好
你用神马公司的内切酶？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-11-01 12:39:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-11-01 12:39:29:
那就单切呗……双酶切不动可能是buffer没配套好
你用神马公司的内切酶？

神马公司？
回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
4楼2010-11-01 12:57:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
楼主单酶切试试看！
赞一下 回复此楼
jiayoubashaonian
5楼2010-11-01 13:40:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keyanhrc

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
若是30bp的话确实太短了。单没切吧。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-11-01 13:47:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linqin1029

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
和这两个位点之间的距离太短关系不是很大，因为一般的PUC18多克隆位点上的两个酶切位点之间的距离有的比30bp还短。估计你这两个酶使用的不是公用的Buffer.
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-11-01 14:53:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
请问你是怎么判断双酶没有切动的，双酶作用时完全没切开？
PS：30 bp的间隔真的不短。
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
8楼2010-11-01 15:10:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):热心鼓励。 2010-11-01 18:53:25
就是，你是怎么判断双酶切是没切开那？电泳，还是神马？
按说30bp的确不断，应该是能切出来的。
还是先判断准了，确实没切开
然后：
1.是否酶失活
2.两个酶的buffer是否一样，你的酶切时候的buffer是否同时满足两个酶
3.酶切条件是否正确
4.实在不行你就单酶切，一个一个的切
赞一下(2人) 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
9楼2010-11-01 15:20:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你判断有切开的依据是什么啊？是电泳条带还是三条？还是别的？有没有可能你已经切开了但是你中间的30bp电泳跑不出来呢？祝好运！
赞一下(1人) 回复此楼
上班族，学习ing……
10楼2010-11-01 15:49:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hflf 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工306分找调剂 +22 沧海轻舟e 2026-04-02 23/1150 2026-04-03 15:08 by hypershenger
[考研] 333求调剂 +9 wfh030413@ 2026-04-03 9/450 2026-04-03 14:20 by 啊俊！
[考研] 085501一志愿天工大，机械专硕求调剂，跨材料 +3 33上 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:08 by 1753564080
[考研] 266求调剂 +3 08电气工程 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:05 by 1753564080
[考研] 调剂 +5 JLLLLLLLLLL 2026-04-03 5/250 2026-04-03 12:17 by 瑜玉同归
[考研] 08工科275分求调剂 +14 AaAa7420 2026-03-31 14/700 2026-04-03 11:13 by cocolv
[基金申请] 请问共同通讯和共同一作的认可度问题 10+4 psa1234 2026-04-01 10/500 2026-04-03 11:08 by Kittylucky
[考研] 抱歉 +5 田洪有 2026-03-30 5/250 2026-04-03 10:24 by linyelide
[考研] 330分求调剂 +15 qzenlc 2026-03-29 15/750 2026-04-02 21:41 by 百灵童888
[考研] 311求调剂 +14 蓝月亮亮 2026-03-30 14/700 2026-04-02 12:18 by 1753564080
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 11/550 2026-04-02 10:52 by lnilvy
[考研] 354求调剂 +4 lxb598 2026-03-31 5/250 2026-04-02 09:55 by Jaylen.
[考研] 085410 一志愿211 22408分数359求调剂 +3 123456789qw 2026-03-31 4/200 2026-04-02 00:06 by 义文wang
[考研] 085602化学工程268分蹲调剂 +8 月照花林。 2026-04-01 8/400 2026-04-01 22:08 by 无际的草原
[考研] 307分求调剂 +14 (o~o) 2026-03-31 15/750 2026-04-01 20:43 by longlotian
[考研] 考研材料工程351分调剂 +5 整个好的 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:36 by topgun2009
[考研] 333求调剂 +4 阿科逸 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:11 by jp9609
[考研] 289求调剂 +7 BrightLL 2026-03-29 7/350 2026-03-31 22:05 by 544594351
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭