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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求教分子高手
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hflf

金虫 (小有名气)
多谢各位，我用的是Takara的BamHⅠ和 XhoⅠ，用的是K buffer这些应该都没有错的，酶切连接做了对照，结果对照和连接物涂板子长的单克隆数量差不多多（20多个），挑了5个克隆，用插入的片段里有的酶做酶切，都没有切动，只能是当初没有切开，单克隆是自连。
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行到水穷处，坐看云起时！
11楼2010-11-01 17:02:20
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Aword

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也遇到过同样的问题，最后是一个一个酶来切的，效果很好。30bp貌似足够长了吧，我记得两个酶切位点之间的极限是12bp，大于12bp就可以的
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12楼2010-11-04 15:49:25
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