24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 965  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zxd95

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PCR的怪现象 已有3人参与

前天我提取植物总RNA,跑胶后发现有基因组污染,反转录之后,使用特异性引物和Pfu进行PCR扩增,结果获得了该基因的cDNA(750bp)和基因组gDNA(1500bp)的亮条带,除此之外又发现了其他2条带,我认为可能是cDNA和gDNA的等位基因,割胶回收可能的cDNA等位基因(1100bp)和gDNA的等位基因(1600bp)2条带,并以他们为模板,使用Pfu和基因特异性引物进行PCR扩增,结果仅得到了750bp的片段。
为什么大约1100bp和1600bp的模板,扩增出来的竟是750bp的片段???
附图:

回复此楼
追梦的人
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cyz20050505

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
昨天忘了说,还有可能是RNA可变剪切体,总之测序就清楚了
4楼2011-04-30 10:15:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

cyz20050505

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-04-29 23:56:19
要想确认,就割胶回收克隆测序就清楚了,非特异扩增的可能性比较大
3楼2011-04-29 23:51:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

毛花许地黄

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我的也是这样,感觉找不出问题,你的问题解决了么?
5楼2017-10-17 22:03:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +8 求上岸的小王 2026-04-10 8/400 2026-04-10 15:09 by hemengdong
[考研] 302分求调剂 +7 凡语祈愿 2026-04-08 8/400 2026-04-10 10:28 by Delta2012
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 求调剂 +3 电气300求调剂不 2026-04-08 3/150 2026-04-10 10:19 by LHGeng
[考研] 286求调剂 +6 草木不言 2026-04-04 6/300 2026-04-09 21:06 by 286640313
[考研] 316求调剂 +3 想读研究生( ?∵ 2026-04-07 3/150 2026-04-09 17:31 by wp06
[考研] 一志愿085404,总分291,四级已过,求调剂 +10 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 12/600 2026-04-09 16:18 by lin-da
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
[考研] 288求调剂 +15 没有答案_ 2026-04-05 15/750 2026-04-09 10:22 by 5268321
[考研] 283电子信息求调剂 +4 三石WL 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:21 by wp06
[考研] 308求调剂 +17 墨墨漠 2026-04-06 17/850 2026-04-09 09:25 by 壹往無前
[考研] 调剂 +3 电气300求调剂不 2026-04-08 6/300 2026-04-08 09:39 by 电气300求调剂不
[考研] 388求调剂 +6 四川王涛 2026-04-07 8/400 2026-04-08 00:17 by JourneyLucky
[考研] 344求调剂 +11 魏子per 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:01 by JourneyLucky
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
[论文投稿] Decision: Revise for Editor还会送审吗 100+3 CccccccccFD 2026-04-04 5/250 2026-04-07 10:58 by 北京莱茵润色
[考研] 求调剂 +4 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 15:22 by wos666
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 268求调剂 +8 你好tg 2026-04-03 9/450 2026-04-04 05:08 by gswylq
信息提示
请填处理意见