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zxd95

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PCR的怪现象已有3人参与

前天我提取植物总RNA,跑胶后发现有基因组污染,反转录之后,使用特异性引物和Pfu进行PCR扩增,结果获得了该基因的cDNA(750bp)和基因组gDNA(1500bp)的亮条带,除此之外又发现了其他2条带,我认为可能是cDNA和gDNA的等位基因,割胶回收可能的cDNA等位基因(1100bp)和gDNA的等位基因(1600bp)2条带,并以他们为模板,使用Pfu和基因特异性引物进行PCR扩增,结果仅得到了750bp的片段。
为什么大约1100bp和1600bp的模板,扩增出来的竟是750bp的片段???
附图:

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追梦的人
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