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宅狼出没

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】为什么提取叶绿素时干材料一定要用95%的乙醇,而新鲜的材料可以用无水乙醇提? 已有10人参与

查找叶绿体色素的方法中发现,有这么一句话.提取叶绿素时干材料一定要用95%的乙醇,而新鲜的材料可以用无水乙醇提取。这是为什么呢
如果我研究的是藻类物质,离心收集的藻沉淀应该算是新鲜的材料把,那是不是应该用无水乙醇呢?
那吸收系数还是原来的么

方法中这样写到:
“。叶绿素a、b在96%乙醇中最大吸收峰的波长分别为665nm和649nm,类胡萝卜素为470nm,可据此列出以下关系式:
          Ca = 13.95D665 – 6.88D649                                           (10)
          Cb = 24.96D649 – 7.32D665                                         (11)
          Cx•c=(1000D470 – 2.05Ca – 114.8Cb)/ 245                           (12)”
最后又有了这么一句话.提取叶绿素时干材料一定要用95%的乙醇,而新鲜的材料可以用无水乙醇提取。那比吸光系数不变么?有没有做过的大人指点一下~谢谢~

[ Last edited by zongyu_1986 on 2011-1-3 at 18:07 ]
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墨池

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 宅狼出没 at 2011-01-03 02:03:55:

亲你好!我用的是663nm~

亲,你好,用的是下面这个计算公式么?如果是滴,可不可以把有这个公式的参考文献给我一份,老师自己给我的实验方案,又没给参考文献,我又不能胡诌一个文献,谢谢亲~

计算方法:
Chla=(12.7×E663-2.69×E645) ×L/(1000×M)
Chla=(2.9×E645-4.68×E663) ×L/(1000×M)
Chl=chla+chlb
式中:L—混合液体积(mL);
M—样品质量(g)。
阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
7楼2011-01-03 10:15:16
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yangli0537

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
caoshangfei2007:有点意思! 2010-10-30 08:41:20
干材料不含水分所以要用含有水的酒精提取,湿材料本身就含水了。
既然选择了远方,便只顾风雨兼程
3楼2010-10-29 21:51:54
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宅狼出没

铜虫 (初入文坛)

★ ★
caoshangfei2007(金币+2):得给楼主加分,我们应助的帖子要都是这样,大家就会都成长很快啊! 2010-11-09 22:40:57
我后来有查到:叶绿素是一种酯,易溶于有机溶剂,还因为叶绿素a与叶绿素b结构中均有一个极性的“头部”,所以用有一定含水量的有机溶剂来提取叶绿素效果更好,植物干材料长用95%的乙醇,新鲜材料水分较高则用无水乙醇,若水分过多叶绿素范儿可能会因为溶解度下降而提取液浑浊。
再后来查找文献中发现,丙酮和乙醇1:1混合提取效率比较好,于是我采用了这种方法,谢谢各位亲的交流,虽然还是有点晕,但还算找到了解决办法,再次感谢大家,鞠躬,我们让这个求助圆满把,嗷嗷!
4楼2010-11-09 09:49:37
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墨池

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 宅狼出没 at 2010-10-29 09:56:02:
查找叶绿体色素的方法中发现,有这么一句话.提取叶绿素时干材料一定要用95%的乙醇,而新鲜的材料可以用无水乙醇提取。这是为什么呢
如果我研究的是藻类物质,离心收集的藻沉淀应该算是新鲜的材料把,那是不是应 ...

LZ,想跟你探讨下,测定叶绿素时使用的俩个波长,很多文献中都不大一样,你选择的是哪两个?我见过663nm,645nm的方法

Chla=(12.7×E663-2.69×E645) ×L/(1000×M)
Chla=(2.9×E645-4.68×E663) ×L/(1000×M)
Chl=chla+chlb
阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
5楼2011-01-02 20:13:07
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