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apple1057

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】细胞复苏不成功，出现了一些问题。已有10人参与

大家好，我们实验室的细胞最近出了些问题，每次复苏后都长得不好，形态改变而且不太增殖，最后在显微镜下观察，贴壁细胞很少，我们养的是PIEC细胞，以前都是消化后12小时就能长满，现在复苏后两天，丰度30%左右，我们实验都很注意，培养基.血清都换了，观察瓶内也没有污染，我想请教一下这是怎么回事？谢谢

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1楼 2010-10-28 14:57:39

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引用回帖:

Originally posted by hzxizh at 2010-11-11 20:17:31:

培养过程中大多是10%的FBS，既可以让细胞长势良好又节省了不必要的成本；冻存时使用20%的FBS，是前辈们的一个经验良方，即冻存液比例为1：2：7。在操作中，也会有不同的改变。
你的问题或许真的就出在细胞冻 ...

谢谢你的建议，我想真的是我们冻存没有程序性降温的原因。那么如果复苏时要用多少浓度的FBS呢？