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【求助】多糖分子量测试结果不正常已有10人参与
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我做植物多糖，采用水提醇沉法，再用SEPHAX-100分离，收集苯酚硫酸显色部分，透析、冻干。用高效凝胶色谱测试。却发现结果不如人意，主峰分子量只有几千。而我的透析膜10000以下应该是不存在的。条件与结果见附件，请高手帮忙分析下原因。 多糖分子量测定方法：高效凝胶过滤色谱法（HPGFC） 仪器：Waters 600 高效液相色谱仪（配2410示差折光检测器和M32工作站） 色谱条件： 色谱柱：Ultrahydrogel™Linear 300mm×7.8mmid×2 流动相：0.1N硝酸钠 流速：0.9ml/min 柱温：45℃ 样品制备：称取样品100mg于25 ml容量瓶中，用流动相溶解，定容。 分子量校正曲线所用葡聚糖标准品(均购置于sigma公司)： Dextran T-2000 (MW2000000) DextranT-580( MW580000) Dextran T-70 (MW70,000) Dextran T-10 (MW10,000) Dextran T-5 (MW2900) Maltaose (MW342) 2# Retention Time Mn Mw MP Polydispersity Area % Area 1 19.850 36588 39753 25394 1.086519 39355 3.65 2 22.117 2341 4670 3914 1.994919 1039324 96.35 |
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