| 查看: 2975 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助】多糖分子量测试结果不正常已有10人参与
|
|||
|
我做植物多糖，采用水提醇沉法，再用SEPHAX-100分离，收集苯酚硫酸显色部分，透析、冻干。用高效凝胶色谱测试。却发现结果不如人意，主峰分子量只有几千。而我的透析膜10000以下应该是不存在的。条件与结果见附件，请高手帮忙分析下原因。 多糖分子量测定方法：高效凝胶过滤色谱法（HPGFC） 仪器：Waters 600 高效液相色谱仪（配2410示差折光检测器和M32工作站） 色谱条件： 色谱柱：Ultrahydrogel™Linear 300mm×7.8mmid×2 流动相：0.1N硝酸钠 流速：0.9ml/min 柱温：45℃ 样品制备：称取样品100mg于25 ml容量瓶中，用流动相溶解，定容。 分子量校正曲线所用葡聚糖标准品(均购置于sigma公司)： Dextran T-2000 (MW2000000) DextranT-580( MW580000) Dextran T-70 (MW70,000) Dextran T-10 (MW10,000) Dextran T-5 (MW2900) Maltaose (MW342) 2# Retention Time Mn Mw MP Polydispersity Area % Area 1 19.850 36588 39753 25394 1.086519 39355 3.65 2 22.117 2341 4670 3914 1.994919 1039324 96.35 |
回复此楼» 猜你喜欢
到新单位后，换了新的研究方向，没有团队，持续积累2区以上论文，能申请到面上吗
已经有7人回复
-
申请2026年博士
已经有5人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有5人回复
-
寻求一种能扛住强氧化性腐蚀性的容器密封件
已经有6人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有7人回复
-
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗
已经有6人回复
-
Bioresource Technology期刊，第一次返修的时候被退回好几次了
已经有7人回复
-
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。
已经有4人回复
-
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢
已经有5人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
gpc 测试分子量
已经有16人回复- 跪求：大分子量粘多糖含量测定方法？？？
已经有5人回复
- 发酵液中含有蔗糖、果糖和多糖（分子量超3000），如何用高效液相定量蔗糖和果糖？
已经有6人回复
- 【求助】测试聚异丁烯数均分子量的方法？
已经有4人回复
- 【求助】多糖分子量测定
已经有8人回复
- 【求助】GPC测试分子量
已经有9人回复
- 【求助】怎么才能测试分离膜的截留分子量？
已经有6人回复
- 【求助】多糖分离纯化分子量分别为500万，19万，5万，应该使用什么型号的凝胶柱
已经有7人回复
- 【求助/交流】多糖纯度和分子量的测定
已经有4人回复
- 【求助】多糖纯化、检测及分子量测定
已经有7人回复
- 【求助】多糖分子量分布计算
已经有4人回复
- 【求助】利用GPC测试PLA-b-PEG的分子量，为甚麽误差很大
已经有9人回复
sunny_windy110
木虫 (正式写手)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 1879.7
- 散金: 4
- 红花: 8
- 帖子: 987
- 在线: 166.2小时
- 虫号: 297418
- 注册: 2006-11-18
- 性别: MM
- 专业: 高分子物理与高分子物理化
3楼2010-10-30 20:31:25
2楼2010-10-30 18:25:04
491468278
至尊木虫 (知名作家)
啄木鸟
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 46146.2
- 红花: 26
- 帖子: 8960
- 在线: 484.9小时
- 虫号: 815585
- 注册: 2009-07-25
- 性别: GG
- 专业: 集成电路制造与封装
4楼2010-11-05 17:10:37
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
zznjut(金币+2):3Q 2010-11-05 22:28:12
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
zznjut(金币+2):3Q 2010-11-05 22:28:12
|
虽然楼上两位说的都有道理，但是可能影响因素还要多啊。由于主峰占了96%以上，而分子量只有几千，你又说不会有1万以下的，所以可能是样品与柱子填料有键和，造成了不正常的晚馏出，也就是楼上说的：可以尝试调节一下pH值，或者换种盐，总之要解开样品的电性、或者样品与柱子填料的吸附，才能分离好。 最好有激光散射检测器，因为可以一步测到绝对分子量，这样就减少了可能的影响因素，便于分析出来到底是什么原因了。例如：如果光散射LS测到主峰绝对分子量有好几万，那就简单多了：很可能是样品有电性、柱子上有吸附或键和。就可以尝试调节pH值、换用别的柱子等等。如果LS测到确实只有几千，那还要找其它原因了。但至少可以缩小可能性的范围了。 另外，我觉得你的校正曲线好像也有点儿问题。做校正曲线不是为了做出来这条曲线，而是为了使你的样品测试能够准确！所以，首先你应该对你的样品的大致分子量做到心中有数，然后根据这个大致范围，选择合适的标样，再做标准曲线，让标准曲线正好涵盖了你的样品的分子量范围，既别太宽泛也别太窄了，而这个范围以外的部分则可以忽略了。例如：你的样品分子量是1万到20万之间，不会超过50万，那么你就在选择1万和20万之间多选择几种标样：5千、1万、5万、9万、12万、17万、20万、24万等等，大分子量段，选择一两个靠谱的就行了，这样做出来的曲线，在你的样品范围可能更精细、准确。你现在的标样，本身就有点儿少，只有5、6个，而且我觉得58万和2百万的全浪费了啊，实测范围的那部分却只有两三个标样，我觉得偏差可能会较大。好像植物高分子样品，一般都不会太大吧？不必选择2百万的标样。对于多糖，我不太熟悉了。我印象当中，弱酸性的居多吧？也就是pH值达约在6--6.8之间吧。我也不敢保证对啊，呵呵。 |
5楼2010-11-05 22:20:14