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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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tongyanna

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】转录因子活性 已有3人参与

各位高手，转录因子的活性测定方法中那个比较好用？蛋白质怎样转进细胞中啊？
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自己的路，自己快乐的走
1楼 2010-10-26 21:23:43
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-10-26 22:32:42
tongyanna(金币+1):谢谢指点！ 2010-10-27 08:40:43
测哪种活性？
至少都有DNA结合活性和转录激活活性吧，有的还能和其他的蛋白相互作用

定性检测DNA Binding活性的话，酵母单杂，凝胶阻滞都行吧
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2楼2010-10-26 21:35:11
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tongyanna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-26 21:35:11:
测哪种活性？
至少都有DNA结合活性和转录激活活性吧，有的还能和其他的蛋白相互作用

定性检测DNA Binding活性的话，酵母单杂，凝胶阻滞都行吧

想测测这个转录因子能否作用目的基因，结合目的基因促使基因表达！凝胶迁移可以吗？
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自己的路，自己快乐的走
3楼2010-10-27 08:38:12
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
silicare(金币+1): 2010-10-27 12:13:29
ChIP是金标准
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4楼2010-10-27 08:48:35
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tongyanna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-27 08:48:35:
ChIP是金标准

芯片技术是好，但是一般实验室不能开展，有没有其他的比较容易的？请高手指点
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自己的路，自己快乐的走
5楼2010-10-27 14:44:01
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
tongyanna(金币+1):细心介绍啊 2010-10-27 21:01:14
引用回帖:
Originally posted by tongyanna at 2010-10-27 14:44:01:

芯片技术是好，但是一般实验室不能开展，有没有其他的比较容易的？请高手指点

不是芯片chip，是染色质免疫共沉淀（ChIP）
就是co-IP联合实时定量
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6楼2010-10-27 15:59:50
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tongyanna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-27 15:59:50:


不是芯片chip，是染色质免疫共沉淀（ChIP）
就是co-IP联合实时定量

非常感谢ATP同学，小女不胜感激！！！！柳暗花明啊！
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自己的路，自己快乐的走
7楼2010-10-28 08:26:35
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tongyanna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-27 15:59:50:


不是芯片chip，是染色质免疫共沉淀（ChIP）
就是co-IP联合实时定量

我看了看，CO-IP是做蛋白质和蛋白质相互作用的，我做的是基因改造过后的转录因子而后测定其生物活性改变没，那这个技术适合吗？我咋不明白呢？
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自己的路，自己快乐的走
8楼2010-10-28 08:58:53
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tongyanna at 2010-10-28 08:58:53:

我看了看，CO-IP是做蛋白质和蛋白质相互作用的，我做的是基因改造过后的转录因子而后测定其生物活性改变没，那这个技术适合吗？我咋不明白呢？

你可以去查查“染色质免疫共沉淀”的资料
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9楼2010-10-28 09:56:00
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tongyanna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-28 09:56:00:


你可以去查查“染色质免疫共沉淀”的资料

很感谢ATP，谢谢了！呵呵呵
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自己的路，自己快乐的走
10楼2010-10-28 18:39:38
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