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tongyanna

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】转录因子活性已有3人参与

各位高手,转录因子的活性测定方法中那个比较好用?蛋白质怎样转进细胞中啊?
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自己的路,自己快乐的走
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ben1147

木虫 (正式写手)


amisking(金币+1):鼓励交流! 2010-10-26 22:32:42
tongyanna(金币+1):谢谢指点! 2010-10-27 08:40:43
测哪种活性?
至少都有DNA结合活性和转录激活活性吧,有的还能和其他的蛋白相互作用

定性检测DNA Binding活性的话,酵母单杂,凝胶阻滞都行吧
2楼2010-10-26 21:35:11
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tongyanna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-26 21:35:11:
测哪种活性?
至少都有DNA结合活性和转录激活活性吧,有的还能和其他的蛋白相互作用

定性检测DNA Binding活性的话,酵母单杂,凝胶阻滞都行吧

想测测这个转录因子能否作用目的基因,结合目的基因促使基因表达!凝胶迁移可以吗?
自己的路,自己快乐的走
3楼2010-10-27 08:38:12
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


silicare(金币+1): 2010-10-27 12:13:29
ChIP是金标准
4楼2010-10-27 08:48:35
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tongyanna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-27 08:48:35:
ChIP是金标准

芯片技术是好,但是一般实验室不能开展,有没有其他的比较容易的?请高手指点
自己的路,自己快乐的走
5楼2010-10-27 14:44:01
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

tongyanna(金币+1):细心介绍啊 2010-10-27 21:01:14
引用回帖:
Originally posted by tongyanna at 2010-10-27 14:44:01:

芯片技术是好,但是一般实验室不能开展,有没有其他的比较容易的?请高手指点

不是芯片chip,是染色质免疫共沉淀(ChIP)
就是co-IP联合实时定量
6楼2010-10-27 15:59:50
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tongyanna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-27 15:59:50:


不是芯片chip,是染色质免疫共沉淀(ChIP)
就是co-IP联合实时定量

非常感谢ATP同学,小女不胜感激!!!!柳暗花明啊!
自己的路,自己快乐的走
7楼2010-10-28 08:26:35
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tongyanna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-27 15:59:50:


不是芯片chip,是染色质免疫共沉淀(ChIP)
就是co-IP联合实时定量

我看了看,CO-IP是做蛋白质和蛋白质相互作用的,我做的是基因改造过后的转录因子而后测定其生物活性改变没,那这个技术适合吗?我咋不明白呢?
自己的路,自己快乐的走
8楼2010-10-28 08:58:53
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tongyanna at 2010-10-28 08:58:53:

我看了看,CO-IP是做蛋白质和蛋白质相互作用的,我做的是基因改造过后的转录因子而后测定其生物活性改变没,那这个技术适合吗?我咋不明白呢?

你可以去查查“染色质免疫共沉淀”的资料
9楼2010-10-28 09:56:00
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tongyanna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-28 09:56:00:


你可以去查查“染色质免疫共沉淀”的资料

很感谢ATP,谢谢了!呵呵呵
自己的路,自己快乐的走
10楼2010-10-28 18:39:38
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